استخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة لرصد ظهور ورم والنمو في نماذج سرطان البنكرياس المهندسة وراثيا
Summary
توضح هذه المقالة استخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة في الفئران المهندسة وراثيا من سرطان البنكرياس. والهدف الرئيسي توفير تعليمات مفصلة للكشف والتقييم لاورام البنكرياس الذاتية.
Abstract
LSL-كراسG12D/+؛ LSL-Trp53R172H/+؛ Pdx-1-لجنة المساواة العرقية (KPC) الماوس نموذج يمثل نموذجا وراثيا المتبعة والمستخدمة بشكل متكرر لتقييم العلاجات الرواية في سرطان البنكرياس. ظهور ورم متغير في نموذج فيلق حماية كوسوفو بين 8 أسابيع وأشهر عدة. ولذلك، أدوات التصوير غير الغازية المطلوبة للشاشة لظهور ورم ورصد الاستجابة للعلاج. لمعالجة هذه المسألة، ظهرت أساليب مختلفة خلال السنوات الماضية. الموجات فوق الصوتية عالية الدقة ومزايا رئيسية مثل غير اختزاع وأوقات الدورة بسرعة ودقة صورة عالية دون التعرض للإشعاع. بيد أن الموجات فوق الصوتية في الفئران ليست تافهة ويكفي المعرفة التشريحية والمهارات العملية المطلوبة لنجاح تنفيذ الموجات فوق الصوتية عالية الدقة في نماذج سرطان البنكرياس الإكلينيكية. مع المادة التالية، يرد دليل عملي مفصل للبطن بالموجات فوق الصوتية في نماذج موريني مع تركيز بوجه خاص على نماذج سرطان البنكرياس الذاتية. وعلاوة على ذلك، يتضمن موجزاً للأخطاء الشائعة وكيفية تجنبها.
Introduction
نماذج الماوس المهندسة وراثيا قد اكتسبت أهمية متزايدة في أبحاث السرطان بسبب قدرتها على الخص عن كثب الطبيعة المعقدة التسرطن البشرية1،،من23. واحدة من الأكثر استخداماً نماذج لدراسة التنمية سرطان البنكرياس، والتدرج والاستجابة العلاجية يتصف بطفرة تفعيل في السرطاني كراس جنبا إلى جنب مع المنظمة الورم p53 القامع4. هذا LSL-كراسG12D/+؛ LSL-Trp53R172H/+؛ Pdx-1-لجنة المساواة العرقية (KPC) الماوس نموذج يحاكي تطور تدريجي من آفات نيوبلسا للسيتولوجيا البنكرياس قبل الغازية (بانين) لسرطان الغازية. فينوتيبيكالي، وضع ما يقرب من جميع الفئران بداك خلال الأشهر الستة الأولى بعد الولادة. بيد مقارنة بنماذج زرع، يكشف عن نموذج مؤسسة البترول الكويتية ظهور ورم اختلافاً كبيرا من 8 أسابيع إلى عدة أشهر4. وبمجرد أورام البنكرياس تصل إلى حجم معين (5-9 ملم في القطر)، تسارع نمو الورم سريعاً والفئران إلى إدراجهم في التجارب السريرية5. ولذلك، الكشف الدقيق عن ظهور ورم وحجم الورم شرطا أساسيا للسوقيات الدراسة السريرية ورصد العلاج. بشكل عام، عدة نهج مثل التصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي)6، والتصوير المقطعي المسح7،،من89 أو الموجات فوق الصوتية عالية الدقة يمكن أن تستخدم لإجراء فحص الورم و 10من العلاج. وقد كل تقنية لها مزايا وعيوب. على الرغم من أن التصوير بالرنين المغناطيسي-أو المقطعي (CT)-تصوير يتيح الحصول على البيانات عالية الدقة فضلا عن حساب حجم دقيقة، وقت دراسة طويلة تحت التخدير العام، ومعدات مكلفة للغاية المطلوبة، ولا تسمح بتكرار المسح الضوئي لفترة طويلة من الزمن. وفي المقابل، تخطيط الصدى الحيوانات الصغيرة هو أسلوب المنشأة التي يمكن أن تستخدم للكشف عن الأمراض البطن في الفئران11. مزايا هذا الأسلوب التصوير قصيرة المسح مرات، عالية الدقة، وإمكانية استخدام الموجات فوق الصوتية دوبلر أو التباين المحسن (سيوس) بالموجات فوق الصوتية لتصور نضح أجهزة في نفس الوقت. بيد أن المعرفة التشريحية وخيال ثلاثي الأبعاد وتدريب عملي شامل مطلوبة لتفسير الصورة الصحيحة.
يرد في المادة التالية، بروتوكول مفصل لاستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة في نموذج فيلق حماية كوسوفو. وعلاوة على ذلك، يصور الصور القياسية بالموجات فوق الصوتية والمسمى مع هياكل الجهاز لتسهيل التوجه للمحقق.
Protocol
Representative Results
Discussion
مع هذا البروتوكول، ويرد وصف مفصل للتحديد الكمي لاورام البنكرياس باستخدام تصوير البطن بالموجات فوق الصوتية عالية الدقة في نماذج الماوس المهندسة وراثيا. في الآونة الأخيرة، نشرت ساسترا et al. وصف مفصل كيفية قياس أورام البنكرياس في نماذج الماوس، ولكن لا تصور إرشادات حول الإعداد والتعامل ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
هذا البحث وأيده Deutsche كريبشيلفي (ماكس إيدير المجموعة لأن: 110972)، منحة رسالة دكتوراه دجفس (للشركات الصغيرة والمتوسطة)، ومنحة Else-كرنر-فريسينيوس-مؤسسة (لرج) في “غوتنجن المركز الطبي في جامعة”. ونشكر بلومبرغ Jutta و Wegner اولريك لخبراء المساعدة التقنية. ونشكر أيضا جميع الفنيين الحيوان في مرفق “غوتنجن المركز الطبي الجامعي” للماوس حفظ الحيوانات. جميع التجارب التي أجريت وفقا للأنظمة الألمانية الرفق بالحيوان.
Materials
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
Riferimenti
- Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine. EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).
- Olive, K. P., Politi, K. . Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer. (2), 131-143 (2014).
- Westphalen, C. B., Olive, K. P. Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer. The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).
- Hingorani, S. R., et al. Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice. Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).
- Frese, K. K., et al. nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer. Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).
- Paredes, J. L., et al. A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI. PLoS One. 9 (3), e92263 (2014).
- Boj, S. F., et al. Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer. Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).
- Aung, W., et al. Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model. Molecular Imaging. 15, (2016).
- Akladios, C. Y., et al. Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats. Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).
- Neesse, A., et al. CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer. Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).
- Sastra, S. A., Olive, K. P. Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound. Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).
