आनुवंशिक रूप से इंजीनियर अग्नाशय के कैंसर के मॉडल में ट्यूमर की शुरुआत और विकास की निगरानी करने के लिए उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड का उपयोग
Summary
यह आलेख आनुवंशिक रूप से इंजीनियर अग्नाशय के कैंसर चूहों में उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड के उपयोग का वर्णन है । प्राथमिक उद्देश्य पता लगाने और अंतर्जात अग्नाशय के ट्यूमर के मूल्यांकन के लिए एक विस्तृत अनुदेश प्रदान करने के लिए है ।
Abstract
द LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) माउस मॉडल एक स्थापित और अक्सर इस्तेमाल किया ट्रांसजेनिक मॉडल अग्नाशय के कैंसर में उपंयास उपचार का मूल्यांकन करने के लिए प्रतिनिधित्व करता है । ट्यूमर शुरुआत 8 सप्ताह और कई महीनों के बीच KPC मॉडल में चर रहा है । इसलिए, गैर इनवेसिव इमेजिंग उपकरण ट्यूमर शुरुआत और उपचार के लिए प्रतिक्रिया के लिए निगरानी के लिए स्क्रीन करने के लिए आवश्यक हैं । इस समस्या को हल करने के लिए, विभिंन दृष्टिकोण पिछले वर्षों में उभरे हैं । उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड जैसे गैर इनवेसिव, तेज सत्र बार और विकिरण जोखिम के बिना एक उच्च छवि संकल्प के रूप में प्रमुख लाभ है । हालांकि, चूहों में अल्ट्रासाउंड तुच्छ और पर्याप्त संरचनात्मक ज्ञान और व्यावहारिक कौशल नहीं है सफलतापूर्वक पूर्व नैदानिक अग्नाशय के कैंसर मॉडल में उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक हैं । निम्नलिखित लेख के साथ, अंतर्जात अग्नाशय के कैंसर मॉडल पर एक विशेष ध्यान देने के साथ murine मॉडल में उदर अल्ट्रासाउंड के लिए एक विस्तृत हाथ पर गाइड प्रस्तुत किया है । इसके अलावा, आम गलतियों का सारांश और कैसे उन से बचने के लिए प्रदान की जाती है ।
Introduction
आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडलों के कैंसर के कारण उनकी क्षमता को बारीकी से मानव कैंसरजनन1,2,3के जटिल प्रकृति दोहराऊंगा के लिए एक बढ़ती महत्व प्राप्त की है । सबसे अक्सर इस्तेमाल किया मॉडलों में से एक अग्नाशय के कैंसर के विकास, प्रगति और चिकित्सीय प्रतिक्रिया के अध्ययन के लिए Kras oncogene में एक सक्रिय उत्परिवर्तन की विशेषता है ट्यूमर शमन p534की एक निष्क्रियता के साथ संयुक्त । यह LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) माउस मॉडल आक्रामक कार्सिनोमा के लिए पूर्व इनवेसिव अग्नाशय intraepithelial neoplasia (PanIN) घावों से कदम वार प्रगति की नकल । Phenotypically, लगभग सभी चूहों जंम के बाद पहले छह महीने के भीतर PDAC विकसित करना । हालांकि, प्रत्यारोपित मॉडलों की तुलना में, KPC मॉडल 8 सप्ताह से कई महीनों के लिए एक उच्च चर ट्यूमर शुरू होने से पता चलता है4। एक बार अग्नाशय ट्यूमर एक निश्चित आकार (व्यास में 5-9 मिमी) तक पहुँचने, ट्यूमर विकास तेजी से तेजी लाने और चूहों के लिए नैदानिक परीक्षणों में दाखिल किया जाना होगा5. इसलिए, ट्यूमर की शुरुआत और ट्यूमर के आकार का सटीक पता लगाने के लिए एक आवश्यक शर्त है नैदानिक अध्ययन रसद और चिकित्सा की निगरानी । सामांय में, चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)6, गणना टोमोग्राफी स्कैनिंग7,8,9 या उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड की तरह कई दृष्टिकोण ट्यूमर स्क्रीनिंग आयोजित करने के लिए नियोजित किया जा सकता है और थैरेपी10. प्रत्येक तकनीक अपने फायदे और कमियां है । हालांकि एमआरआई-या गणना टोमोग्राफी (सीटी)-इमेजिंग उच्च संकल्प डेटा अधिग्रहण के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सटीक मात्रा गणना, सामान्य बेहोशी की आवाज के तहत लंबे समय तक परीक्षा के वक्त की अनुमति देता है, और बहुत महंगा उपकरण की आवश्यकता है, और अक्सर अनुमति नहीं है समय की एक लंबी अवधि के दौरान स्कैनिंग । इसके विपरीत, छोटे जानवर ट्रा एक स्थापित विधि है कि चूहों11में उदर विकृतियों के लिए स्क्रीन करने के लिए नियोजित किया जा सकता है । इस इमेजिंग विधि के लाभ कम स्कैनिंग बार, उच्च संकल्प, और संभावना डॉपलर अल्ट्रासाउंड या विपरीत बढ़ाया अल्ट्रासाउंड (CEUS) का उपयोग करने के लिए समानांतर में अंगों की छिड़काव कल्पना कर रहे हैं । हालांकि, संरचनात्मक ज्ञान, 3 डी कल्पना और पूरी तरह से व्यावहारिक प्रशिक्षण सही छवि व्याख्या के लिए आवश्यक हैं ।
निंनलिखित लेख में, KPC मॉडल में उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड के उपयोग के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान की जाती है । इसके अलावा, मानक अल्ट्रासाउंड छवियों को दर्शाया गया है और खोजी के लिए अभिविन्यास की सुविधा के लिए अंग संरचनाओं के साथ लेबल ।
Protocol
Representative Results
Discussion
इस प्रोटोकॉल के साथ, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल में उच्च संकल्प पेट अल्ट्रासाउंड इमेजिंग का उपयोग अग्नाशय ट्यूमर को बढ़ाता है के लिए एक विस्तृत वर्णन प्रदान की जाती है । हाल ही में, Sastra एट अल ।</em…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस अनुसंधान के ड्यूश Krebshilfe (मैक्स ईडर समूह एक: ११०९७२), एक DGVS डॉक्टरेट थीसिस छात्रवृत्ति (SMB), और एक और -Kröner-Fresenius फाउंडेशन छात्रवृत्ति (RGG) के लिए विश्वविद्यालय के मेडिकल सेंटर Goettingen पर द्वारा समर्थित किया गया था । हम विशेषज्ञ तकनीकी सहायता के लिए जुटता ब्लमबर्ग और Ulrike Wegner को धन्यवाद देते हैं । हम भी माउस रखने के लिए विश्वविद्यालय के चिकित्सा केंद्र Goettingen के पशु सुविधा पर सभी पशु तकनीशियनों का धन्यवाद. सभी प्रयोगों जर्मन पशु कल्याण नियमों के अनुसार प्रदर्शन किया गया ।
Materials
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
Riferimenti
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