高解像度モニター腫瘍発症と遺伝子組み換えの膵癌モデルの成長に超音波を利用しました。
Summary
この記事では、膵がんの遺伝子組み換えマウスの高分解能超音波の利用について説明します。主な目的は、内因性膵腫瘍の検出と評価の詳細な指示を提供するためにです。
Abstract
LSL KrasG12D/+;LSL Trp53R172H/+;Pdx 1 Cre (KPC) マウス モデルは膵臓癌の新規治療法を評価するための確立され、頻繁に使用されるトランスジェニック モデルを表します。腫瘍の発症は、8 週間と数ヶ月間 KPC モデルの変数です。したがって、非侵襲的イメージング ツールが腫瘍発症のスクリーンと治療に対する反応のモニターに必要です。この問題を解決するには、別のアプローチは最後の年にわたって浮上しています。高解像度超音波には、非侵襲、高速セッション時間および放射線被曝なし高画像解像度などの主要な利点があります。しかし、マウスの超音波ではない些細なと十分な解剖学的知識、臨床膵癌モデルにおける高分解能超音波を正常に実行するために必要な実践的なスキル。次の記事では、内因性の膵癌モデルの特定のフォーカスを持つマウスモデルでの腹部超音波検査の詳細な実践的なガイドが表示されます。さらに、よくある間違いとその回避方法の概要を提供します。
Introduction
遺伝子組み換えマウス モデルは、がん研究能力に密接にヒトの発がん1,2,3の複雑な性質を要約するための増加する重要性を得ています。膵癌の開発を研究するモデルを頻繁に使用、ほとんどの 1 つ、進行と治療反応は腫瘍のサプレッサー p534の不活化と組み合わせて Kras 遺伝子の活性化変異によって特徴付けられます。このの LSL KrasG12D/+;LSL Trp53R172H/+;Pdx 1 Cre (KPC) マウス モデル事前侵襲的な膵上皮内腫瘍 (パニン) 病変から浸潤癌への段階的進行を模倣しています。表現型は、ほぼすべてのマウスは出生後最初の 6 ヶ月以内 PDAC を開発します。ただし、移植モデルと比較して、KPC モデルはいくつかのヶ月4から 8 週間非常に可変腫瘍発症を明らかにします。膵臓の腫瘍が特定のサイズ (直径 5-9 mm) に達すれば、腫瘍の成長が急速に加速してマウスが前臨床試験5に登録する必要があります。したがって、腫瘍発生、腫瘍サイズの正確な検出は、ロジスティクス前臨床研究と治療の監視のための必須の前提条件です。一般に、いくつかのアプローチが好き磁気共鳴画像 (MRI)67,8,9または高解像度超音波スキャン コンピューター断層撮影は腫瘍のスクリーニングを行うために使用できる、療法10。各テクニックは、その利点と欠点。MRI のコンピューター断層撮影 (CT) または -イメージングにより、正確な体積計算同様、一般的な鎮静下で長期にわたる試験時間の高解像度データ集録と非常に高価な機器が必要で、頻繁には許しません。長い期間にわたってスキャン。対照的に、小動物の超音波検査は、画面のマウス11で腹部の病理学を用いることができる確立されたメソッドです。このイメージング法の利点は、短い時間、高解像度のスキャンとドップラー超音波またはコントラストを使用する可能性を強化 (CEUS) 超音波を用いた並列で臓器の灌流を可視化します。ただし、解剖学的知識、3 D の想像力と徹底した実践的なトレーニングは、正しいイメージの解釈の必要です。
次の記事では、KPC モデルの高分解能超音波を利用するための詳しいプロトコルが提供されます。さらに、標準的な超音波画像を描かれている、調査官の向きを容易に臓器の構造を持つラベルします。
Protocol
Representative Results
Discussion
このプロトコルでは、遺伝子組み換えマウス モデルにおける高分解能の腹部超音波画像を用いた膵腫瘍を定量化するための詳細な説明が提供されます。最近、論らどのようにマウス モデルでもない準備をし、以降のすべてのステップのための前提条件は、11を示されていた処理の可視化について膵腫瘍を定量化する詳細な説明を出版しました。この原稿の全体的な目…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究はドイツの Krebshilfeによって支えられた (Max、エーダー グループ: 110972)、(SMB) に DGVS 博士論文奨学金と大学医療センター ゲッティンゲンで (RGG) にElse Kröner フレゼニウス基礎奨学金。専門的な技術支援、ユッタ ・ ブランバーグとウルリケ ・ ウェグナーに感謝します。また、マウスを維持の大学医療センター ゲッティンゲンの動物施設ですべて動物技術者を感謝いたします。すべての実験は、ドイツの動物福祉規則に従って行われました。
Materials
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
Riferimenti
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