Forberedelse, procedurer og vurdering af trombocyt-Rich Plasma injektion til behandling af knæet Osteoarthritis

Summary

Knæet slidgigt er ofte set i ortopædisk afdeling. Vi indføre i detaljer hele knæet osteoarthritis behandlingsproces med trombocyt-rich plasma injektion, herunder forberedelse, procedurer og evaluering.

Abstract

Knæet slidgigt (KOA) er en af de hyppigst forekommende sygdomme i ortopædisk afdeling. Eksisterende ikke-kirurgiske behandlinger har en begrænset effekt på reparation af brusk og knogle regenerering. Trombocyt-rich plasma (PRP) er en autolog bioaktive stof, der kan reparere brusk skade og fremskynde knogle regenerering effektivt. Dog rapportering af PRP forberedelse protokoller i kliniske studier er meget inkonsekvent, med størstedelen af studier, der giver tilstrækkelige oplysninger til at tillade protokollen til gengives. Vi beskriver en gentagelig metode til forberedelse PRP visuelt, behandling af KOA ved hjælp af PRP intra-artikulær injektion, og metoder til evaluering af resultatet. PRP blev udarbejdet ved hjælp af manuel dobbelt centrifugering. PRP lag blev udvundet fra perifert blod og bruges til knæ fælles hulrum injektion. Evalueringer indgår vurderinger af blod trombocyt koncentrationer og kliniske resultater. Forberedelse af PRP ved manuel centrifugering kræver mindre apparater og er billigere end plasma filtrering eller centrifugering ved hjælp af udstyr. Centrifugeringstiden af vores dobbelt centrifugering metode var 6 og 5 minutter til de respektive centrifugations på kræfter af 800 og 1400 x g, henholdsvis, for at muliggøre den konsekvente forberedelse af standardiseret PRP. Men en manuel metode er modtagelige for betjeningsfejl, og PRP batch forberedelse er ikke tilgængelig. Intra-artikulær injektion af PRP viste sig for at være en effektiv behandling af knæet osteoarthritis. Hele behandlingen procedure tog mindre end 30 minutter, blod trombocyt koncentrationen af PRP kunne være standardiseret og behandling var vist sig for at være effektive, når det evalueres af opfølgning.

Introduction

Knæet slidgigt (KOA) er en af de mest hyppige eksempler sygdomme i ortopædisk afdeling; 30-50% af mennesker over 65 år opleve denne sygdom¹. I øjeblikket omfatter den konservative ledelse af KOA hovedsagelig oral administration af non-steroide anti-inflammatoriske lægemidler og brusk næringsstof narkotika, intra-artikulær injektion af natrium hyaluronate og fysioterapi. Men disse metoder kan ikke stoppe processen med knæet leddegeneration². Ledbrusken fejl kan forårsage artikulære overflade slid, fælles ustabilitet og metaboliske ændringer, som er en del af patogenesen af KOA³. Men på grund af mangel af blodkar, nerver og lymfoide væv i ledbrusken, nyttiggørelse efter en skade er vanskeligt. En effektiv metode til reparation af brusk er især vigtig for behandlingen af KOA. Behandling af osteoclasia er også et centralt fokus i KOA behandling.

Trombocyt-rich plasma (PRP) er en autolog bioaktive stof, og anvendelsen af PRP til knogle og fælles problemer er i stigende grad undersøgt. Den biologiske begrundelse for den kliniske anvendelse af PRP omfatter dens indvirkning på den lokale levering af vækstfaktorer og ændring af det inflammatoriske respons og dens positive virkninger på celle spredning og differentiering⁴. Efter aktivering efter intra-artikulær injektion, PRP frigiver α-granul gennem degranulering og udskiller forskellige vækstfaktorer, herunder Trombocyt-afledt vækst faktor, at omdanne vækst faktor-β, insulin-lignende vækst faktor, den epidermal vækstfaktor, den vaskulære endotel vækstfaktor, og fibroblast vækstfaktor. Disse fremme osteoblastdannelse og Chondrocyt spredning, hæmme brusk degeneration, styrke stabiliteten i brusk og subchondral knogle, regulere gen expression væv hæmmer af metalloproteinase og opretholde balancen mellem syntese og nedbrydning af proteoglycaner^5,6. Derfor, PRP kan reparere brusk skade og fremskynde knogle regenerering.

Resultatet af PRP injektion påvirkes af forskellige faktorer, herunder prøveudtagning site⁷, centrifuge forberedelse metode⁸og brugen af antikoagulantia⁹ og aktivatorer¹⁰. Der er nogenlunde 3 typer centrifugal metoder at forberede PRP. Manuel centrifugering, udstyr-baserede centrifugering eller plasma filtrering teknikker er til rådighed, selv om manuel og udstyr-baserede metoder er de mest almindeligt anvendte. Den manuelle metode kræver mindst udstyr, er bekvem, er lav pris og er enkel at udføre (figur 1). PRP er udarbejdet af udførelsen af manuel centrifugering to gange. Blandet perifert blod og antikoagulans centrifugeres for at adskille hemocytes fra plasma og blodplader. Efter kassere de røde blodlegemer på det nederste lag, centrifugeres centrifugatet re adskillelse, inddele den i supernatanten trombocyt-fattige plasma, midterste PRP og subnatant resterende røde blodlegemer. Det midterste lag bruges til knæ fælles hulrum injektion (hvis mængden er utilstrækkelige, kan der drages en del af supernatanten). Evalueringer af metoden omfatter vurderinger af blod trombocyt koncentration og kliniske resultater.

Rapportering af PRP forberedelse protokoller i kliniske studier er meget inkonsekvent, og fleste undersøgelser giver ikke tilstrækkelige oplysninger til at tillade protokol skal gengives¹¹. Her, beskriver vi en reproducerbar metode til forberedelse af PRP og behandling af KOA med PRP intra-artikulær injektion, med evaluering af resultatet. Inklusionskriterierne var patienter med knæ slidgigt, der har dårlig smertelindring til enkle smertestillende medicin (såsom acetaminophen) og konservativ behandling. Udelukkelseskriterier inkluderet patienter med venøs tilbagevenden eller lymfe dræning lidelse; patienter med knæ ledinfektioner; patienter med en hudsygdom eller infektion i området injektion; patienter med feber; patienter med koaguleringsmiddel funktion abnormitet; patienter med alvorlige hjerte-kar-sygdom. Hele behandlingen procedure tager mindre end 30 minutter, og blodet trombocyt koncentrationen af PRP er bevist at nå frem til en standardiseret måling. Dens effektivitet er påvist ved at evaluere resultaterne under tæt opfølgning.

Protocol

De beskrevne metoder blev godkendt af etiske udvalg af Guangdong General Hospital. 1. få PRP ved manuel centrifugering Forberede patienten i en liggende stilling i en steril laminar flow operationsstuen med en behagelig rumtemperatur og luftfugtighed: værelse temperaturen er 22 ° C og værelse fugtighed er 60%. Bruge en 1 mL sprøjte at tegne 0,2 mL af heparin natrium (2 mL = 12.500 U), og derefter fugtes en 50 mL sprøjte.Bemærk: 3 mL af natriumcitrat er også typi…

Representative Results

Som et resultat af trombocyt tælle af PRP nået en standard koncentration niveau af 1121 x 103/µL. Vi gennemførte de 15 opfølgende undersøgelser beskrevet i protokollen om en 55-årig mandlig patient med tidlig KOA. Det var indlysende, at tidlige kliniske resultater var tilfredsstillende efter den intra-artikulær administration af PRP (figur 2). Mellemlang sigt effekten var dog lidt ringere. Et markant signifikant analgetisk effekt blev obser…

Discussion

Koncentrationen af blodplader i normalt humant blod er mellem 150.000/µL og 350.000/µL, og det er en udbredt opfattelse at blod trombocyt koncentration af PRP bør nå 1.000.000/µL, som er 3 til 5 gange normale koncentrationer⁹. Ifølge POTE hierarkisk system menes det, at PRP har ingen indlysende effekt når blod trombocyt koncentrationen er mindre end tre gange den normale koncentration, mens PRP har en hæmmende effekt, når dens blod trombocyt koncentration er mere end seks gange normal kon…

Materials

Centrifuge	Eppendorf	5702
Centrifuge tube	CORNING	430828
Horizontal rotor	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	310173	Disinfect the skin
1ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.4*13 RWLB
10ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	1.2*38 TWSB
50ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.7*32 TWLB
Medical Tourniquet	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Single-use sterile rubber surgical gloves	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Disposable Draw Blood Needle	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.55*20 L(II) RWLB
Heparin Sodium Injection	SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD	1706101	2ml:12500U
Jifro Hand Antiseptic Rinse Free Gel	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	311793
Medical Cotton Swab	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Disinfect the skin
10ml Normal Saline	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Automatic Blood Cell Analyzer	Beckman Coulter	LH-750
Hole-towe			Sterile
Anticoagulation Tube(Blood Collection Tubes, K2E 3.6mg)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Store in a cool dry place within 4 to 25 degrees Celcius
Tweezers	RWD LIFE SCIENCE	F12006-10
Sterile Gauze	Guangdong Ze Chang Trade Co., LTD	170915
Adhesive Plaster	3M Transpore	1527C-0
Skin Marker Pen	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., LTD	10110