Uso di Autometallography per localizzare e semi-quantificare argento nei tessuti dei cetacei

Wen-Ta Li; Bang-Yeh Liou; Wei-Cheng Yang; Meng-Hsien Chen; Hui-Wen Chang; Hue-Ying Chiou; Victor Fei Pang; Chian-Ren Jeng

doi:10.3791/58232

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Articolo metodologico

Uso di Autometallography per localizzare e semi-quantificare argento nei tessuti dei cetacei

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DOI:

10.3791/58232

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4 ottobre 2018

Wen-Ta Li¹ , Bang-Yeh Liou¹ , Wei-Cheng Yang² , Meng-Hsien Chen³ , Hui-Wen Chang¹^,² , Hue-Ying Chiou⁴ , Victor Fei Pang¹^,² , Chian-Ren Jeng¹^,²

¹Graduate Institute of Molecular and Comparative Pathobiology, National Taiwan University, ²School of Veterinary Medicine, National Taiwan University, ³Department of Oceanography and Asia-Pacific Ocean Research Center, National Sun Yat-sen University, ⁴Graduate Institute of Veterinary Pathobiology, National Chung Hsing University

In questo articolo

Sommario

Un protocollo è presentato per localizzare Ag nei tessuti dei cetacei di fegato e reni di autometallography. Inoltre, un nuovo dosaggio, denominato il dosaggio di Ag istologico dei cetacei (CHAA) è stato sviluppato per stimare le concentrazioni di Ag in quei tessuti.

Abstract

Nanoparticelle d'argento (AgNPs) sono stati ampiamente utilizzate in prodotti commerciali, tra cui tessuti, cosmetici e articoli sanitari, a causa della loro forte effetti antimicrobici. Essi inoltre possono essere rilasciate nell'ambiente e si accumulano nell'oceano. Pertanto, AgNPs sono la fonte principale di contaminazione Ag e sta aumentando la consapevolezza pubblica della tossicità ambientale di Ag. Precedenti studi hanno dimostrato il bioaccumulo (tra i produttori) e l'ingrandimento (in consumatori/predatori) di Ag. Cetacei, come i superpredatori dell'oceano, possono essere negativamente influenzate dai composti Ag/Ag. Sebbene le concentrazioni dei composti di Ag/Ag nei tessuti dei cetacei possono essere misurate dalla spettroscopia di massa di plasma accoppiato induttivamente (ICP-MS), l'uso dell'ICP-MS è limitata dal suo alto costo di capitale e l'obbligo di deposito/preparazione di tessuti. Di conseguenza, un metodo autometallography (AMG) con un'analisi quantitativa di immagine utilizzando, formalina-fisse, paraffina-incastonato del tessuto (FFPE) può essere un metodo di adiuvante per localizzare la distribuzione Ag a livello suborgan e stimare la concentrazione di Ag in cetaceo tessuti. I segnali positivi di AMG sono principalmente marroni a neri granuli di varie dimensioni nel citoplasma dell'epitelio tubolare renale prossimale, epatociti e cellule di Kupffer. Occasionalmente, alcuni amorfo giallo dorato al marroni segnali positivi di AMG sono notati nel lume e della membrana dello scantinato di alcuni tubuli renali prossimali. Il dosaggio per stimare la concentrazione di Ag è denominato il cetaceo istologico Ag Assay (CHAA), che è un modello di regressione stabilito dai dati immagine analisi quantitativa del metodo AMG e ICP-MS. L'uso di AMG con CHAA per localizzare e semi-quantificare metalli pesanti fornisce una metodologia conveniente per studi spazio-temporali e cross-specie.

Introduzione

Nanoparticelle d'argento (AgNPs) sono stati ampiamente utilizzate in prodotti commerciali, tra cui elementi di assistenza sanitaria, a causa di loro grandi effetti antimicrobici¹^,², cosmetici e tessili. Pertanto, la produzione di AgNPs e il numero di prodotti contenenti AgNP sono aumentati nel corso del tempo³^,⁴. Tuttavia, AgNPs possono essere rilasciati nell'ambiente e si accumulano in oceano⁵^,⁶. Essi sono diventati la principale fonte di contaminazione Ag, e sta aumentando la consapevolezza d....