Summary

Farelerde kolon anastomoz oluşturulması

Published: January 17, 2019
doi:

Summary

Anastomoz kaçağı ya da ameliyat sonrası arıza bir önemli ameliyat sonrası morbidite ve mortalite nedenidir. Bir kolon anastomoz oluşturmak için bizim ameliyat anastomoses şifa mekanizmaları çalışmak için güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntemdir.

Abstract

Bağırsak anastomoses seçmeli ve acil işlemlerinde yaygın olarak yapılmaktadır. Öyle olsa bile, anastomoz kaçağı kolon ameliyatları çok korkulan bir komplikasyonlar ve cerrahi anastomoses, ilâ % 26 ile böyle bir sızıntı olan hastalar için % 39’olmanın ölüm meydana gelebilir. Şu anda, bir yetersizlik anastomoz şifa hücresel mekanizmaları ayrıntılı veri kalır. Önleyici stratejileri ve tedavi şekilleri anastomoz kaçağı için büyük ölçüde daha iyi bir uygun anastomoz iyileşmesi anlayış tarafından potentiated.

Bir fare modeli önceki çalışmalar fare anastomoz en klinik olarak insan durumda hayvan diğer modeller ile karşılaştırıldığında benzer olduğunu göstermiştir olarak idealdir. Biz daha fazla gösterim amacıyla anastomoz iyileşme sağlayacak farelerde kolon anastomoz kolayca tekrarlanabilir bir fare modeli sunuyoruz.

Introduction

Bağırsak cerrahi anastomoz çok korkulan komplikasyonu anastomoz arıza veya sızıntı var. Anastomoz kaçağı, hangi dökülme intraluminal İçindekiler karın boşluğuna neden olur, yaşamı tehdit eden ve can intra abdominal sepsis için hızlı bir şekilde kurşun; şok fiyatlar % %0,3 5.5 için ince bağırsak anastomoses takip değişir ve % 0,5 ve kolon anastomoses1,2için % 26 arasında yükselmeye. Kaçakları takip mortalite oranları yüksek hızlı başlangıçlı sepsise ve ölüme intraabdominal kirlenme3takip hızlı ilerlemesi nedeniyle % 39 olarak olabilir. Önleyici stratejileri ve tedavi yaklaşımları şu anda tam olarak anlaşılamamıştır patofizyolojisi üzerinde temel alır.

Şu anda, anastomoz iyileşmesi kez daha yaygın olarak okudu kutanöz yara iyileşmesi için hangi nispeten yoksul bir faks olduğunu gösteriyor karşılaştırılır. Şifa örtüşen aşamaları, ilk gecikme faz ile başlayan bir dizi oluşur. Gün 0-4 sonra intestinal anastomoz oluşturulması sırasında gecikme faz yaranın hücresel enkaz temizler bir akut enflamatuar yanıt tarafından tanımlanır. Daha sonra gün içinde 3-4, fibroblastic yayılması ve kolajen üretimini simgeliyor fibrophasia faz. Son olarak, 10 gün sonra kollajen yeniden uzun bir süre ve olgunlaşma aşamasında bilinir. Not anastomoz gücü oldukça düşüktür ve cerrahi olarak yerleştirilmiş zımba dışsal desteğinde bağlıdır veya kollajen yatırdığınız4kadar dikiş önemlidir. Rolünü anlama ve zamanlama her katman bağırsak duvarının anastomoz yara iyileşmesi ve makrofajlar gibi elucidating vekil işaretleri gibi inflamatuar aracılı hücre türleri anastomoz hata tahmin için katılımı çalış veya başarı olabilir büyük morbidite, mortalite ve iki nokta üst üste işlemleri5takip sağlık harcamaları azaltmak.

Fare modeli yaramak insan anastomoz6taklit içinde önceki çalışmalarda gösterilmiştir. Orada iken fare kolon anastomoz modeli, özellikle Komen vd tarafından açıklanan yöntemi popüler, kanıtlanmış ve iyi çalışılmış örnekleri 7, ileocecal veya colocolonic anastomoz teknikleri8artan bu modeller lehine. Önceki çalışmalarda insan hastaların kaçak oranlarındaki ileocecal, colocolonic ve anatomik Mekanlar farklı, daha fazla deneysel modeller ihtiyacını vurgulayarak kolorektal anastomoses arasında anlamlı bir fark gösterdi. Ek, halk kullanılan yöntemleri-kasten bir anastomoz kaçağı oluşturur bir model geliştirmeyi amaçlayan yerine normal anastomoz yara9şifa için gereken hücresel mekanizmaları aydınlatmak. Fare modelleri geçmişte denedi ancak anastomoz yırtılması oranları ve/veya sızıntı (Yani, apse oluşumu) insan ve fare6,7önemli ölçüde daha düşük belirtileri vardır. Ayrıca, daha fazla genetik olarak değiştirilmiş deneysel satırlar fareler daha farelerde kullanılabilir. Bu fare modeli daha az bir anastomoz modeli için kullanışlıdır. Buna ek olarak, domuz ve köpek modelleri fare modeli6,7‘ den daha az klinik araştırma oldu.

Güvenli, teknik olarak basit ve kolayca ve hızlı bir şekilde tekrarlanabilir yordamı kolon anastomoses anastomoz yara iyileşme10 underreported mekanizması içine daha fazla araştırma kolaylaştırmak gerektiğini bir fare modeli oluşturulması için önerdiğimiz .

Protocol

Aşağıdaki iletişim kuralı Oklahoma Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi kurumsal hayvan bakımı ve kullanmak Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış ve araştırma hayvanlar kullanımı ile ilgili tüm kurumsal etik kuralları ile uyumludur. Ayrıca, tüm deneyler ile ilgili deneysel hayvan araştırma kurumsal, eyalet ve federal düzenlemelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Not: Bu iletişim kuralı için biz 12 ila 72 haftalık kadın ve erkek congenic-yetiştirilen C57B…

Representative Results

7 ameliyat günü, anastomoz de iyileşti. Anastomoz zaman noktaları önce ve sonra yedi gün daha iyi anastomoz iyileşmesi aşamaları göstermek hasat edilebilir. Şekil 9′ da histolojik analiz (fibrotik kollajen trichrome boyama tarafından görüntülenmiştir) gösterir yanıt aracılı düz kas Alfa-aktin olumlu myofibroblasts tarafından. Ancak, histolojik analizler sonuçlarından fareler, özellikle yeniden epithelialization ve myofibroblasts anast…

Discussion

Başarısını sağlamak ve bu yordamı ile ilişkili morbidite/ölüm en aza indirmek için birkaç temel adım vardır. İlk olarak, bağırsak dokusu dikkatli işleme emin olun ve ne zaman iki nokta üst üste ortaya çıkarmak için iç organlar dönen çekiş yaralanma önlemek için dikkat ediniz. Bağırsak veya bıçaklanmasından üzerinde aşırı gerginlik yaralanma bağırsak veya damarlara ve neden bağırsak nekroz anastomoz sitesinden yapabilirsiniz. Ayrıca, sharp forceps veya forseps dişleri olan bağı…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Hiçbiri

Materials

C57BL6/J mice Jackson Labs #00664 
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole 
Isothesia isoflurane Henry Schein  50033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharma Inc NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Chloraprep Shampoo Medline APL82287
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle Henry Schein  6546037
Blue monofilament suture 24” BV-1 needle Henry Schein  8305H Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". Cole- Parmer EW-10818-06
Medline Sterile lubricating jelly Medline MDS032273H

Riferimenti

  1. Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
  2. Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
  3. Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
  4. Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
  5. Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
  6. Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
  7. Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
  8. Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
  9. Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
  10. Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).

Play Video

Citazione di questo articolo
McCarthy, C. K., McGaha, P. K., Rozich, N. S., Yokell, N. A., Lees, J. S., Berry, W. L. Creation of Colonic Anastomosis in Mice. J. Vis. Exp. (143), e58742, doi:10.3791/58742 (2019).

View Video