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Articolo metodologico

Misurazione della dipendenza da campo magnetico di rilassamento Spin-Lattice di iperpolarizzato [1-13C]pyruvate

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DOI:

10.3791/59399

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13 settembre 2019

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In questo articolo

Sommario

Vi presentiamo un protocollo per misurare la dipendenza del campo magnetico del tempo di rilassamento spin-reticolo di 13composti arricchiti con C, iperpolarizzati per mezzo di polarizzazione nucleare dinamica, utilizzando una rilassantesi veloce ciclabile. In particolare, lo abbiamo dimostrato con [1-13C]pyruvate, ma il protocollo potrebbe essere esteso ad altri substrati iperpolarizzati.

Abstract

Il limite fondamentale per le applicazioni di imaging in vivo di composti iperpolarizzati arricchiti con 13C è i loro tempi finiti di rilassamento del reticolo spin. Vari fattori influenzano i tassi di rilassamento, come la composizione del buffer, il pH della soluzione, la temperatura e il campo magnetico. A quest'ultimo aspetto, il tempo di rilassamento del reticolo spin può essere misurato ai punti di forza dei campi clinici, ma nei campi inferiori, dove questi composti vengono erogati dal polarizzatore e trasportati alla risonanza magnetica, il rilassamento è ancora più veloce e difficile da misurare. Per comprendere meglio la quantità di magnetizzazione persa durante il trasporto, abbiamo usato la rilassantigia veloce in ciclizzazione del campo, con il rilevamento della risonanza magnetica di 13nuclei C a 0,75 T, per misurare la dispersione della risonanza magnetica nucleare del tempo di rilassamento giro-reticolo di iperpolarizzato [1-13C]pyruvate. La polarizzazione nucleare dinamica di dissoluzione è stata utilizzata per produrre campioni iperpolarizzati di piravavi ad una concentrazione di 80 mmol/L e pH fisiologico (7,8). Queste soluzioni sono state rapidamente trasferite a un rilassante veloce in bicicletta sul campo, in modo che il rilassamento della magnetizzazione del campione potesse essere misurato in funzione del tempo utilizzando un piccolo angolo di inversione calibrato (3-5 gradini). Per mappare la dispersione T1 del C-1 di pyruvate, abbiamo registrato dati per diversi campi di rilassamento compresi tra 0,237 mT e 0.705 T. Con queste informazioni, abbiamo determinato un'equazione empirica per stimare il rilassamento del reticolo spin-attico del substrato iperpolarizzato all'interno della gamma citata di campi magnetici. Questi risultati possono essere utilizzati per prevedere la quantità di magnetizzazione persa durante il trasporto e per migliorare i progetti sperimentali per ridurre al minimo la perdita del segnale.

Introduzione

L'imaging spettroscopico a risonanza magnetica (MRSI) può produrre mappe spaziali dei metaboliti rilevati dall'imaging spettroscopico, ma il suo uso pratico è spesso limitato dalla sua sensibilità relativamente bassa. Questa bassa sensibilità dell'imaging a risonanza magnetica in vivo e dei metodi di spettroscopia deriva dal piccolo grado di magnetizzazione nucleare ottenibile a temperature corporee e ragionevoli punti di forza del campo magnetico. Tuttavia, questa limitazione può essere superata dall'uso della polarizzazione nucleare dinamica (DNP) per migliorare notevolmente la magnetizzazione in vitro dei substrati liquidi, che vengono successivamente iniettati al ....

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Protocollo

1. Preparazione del campione

NOTA: i passaggi 1.1-1.8 vengono eseguiti una sola volta

  1. Preparare 1 mL di stock 13C-enriched pyruvic acid solution, ampiamente utilizzato per la ricerca in vivo 1,2,5,6, costituito da 15-mmol/L di triarylmetil radicale sciolto in [1- 13 del sistema C]acido pirorvico (vedere Tabella dei materiali). Le aliquote di questa soluzione di riserva saranno utilizzate per i campioni che saranno polarizzati individualmente e successivamen....

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Risultati

La figura 2 presenta un esempio di sweep a microonde ad alta risoluzione a piena gamma per l'acido pirovico. Per il caso presentato, tale frequenza ottimale di microonde corrisponde a 94.128 GHz, evidenziata nell'inserto della figura. Il nostro sistema DNP può normalmente funzionare nell'intervallo da 93,750 GHz a 94,241 GHz con dimensioni del gradino di 1 MHz, tempo di polarizzazione fino a 600 s e potenza fino a 100 mW. Una gamma completa di frequenze è studiata solo per nuovi substrati. T.......

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Discussione

L'uso di DNP per migliorare l'acquisizione del segnale è una soluzione tecnica al segnale di risonanza magnetica insufficiente disponibile da 13nuclei C a concentrazioni limitate, come quelle utilizzate nelle iniezioni di animali, ma presenta altre sfide sperimentali. Ogni misurazione di rilassamento illustrata nella Figura 7 rappresenta una misura di un campione preparato in modo univoco perché non può essere ripolarizzato dopo la dissoluzione per la rimisurazione. Ciò porta inev.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno divulgazioni.

Ringraziamenti

Gli autori desiderano ringraziare l'Ontario Institute for Cancer Research, Imaging Translation Program e il Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada per finanziare questa ricerca. Ci piace anche riconoscere utili discussioni con Albert Chen, GE Healthcare, Toronto, Canada, Gianni Ferrante, Stelar s.r.l., Italia, e William Mander, Oxford Instruments, Regno Unito.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
[1-13C]Acido piruvicoSigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA677175
Tubo NMR da 10 mmNorell, Inc., Morganton NC, USA1001-8
Acqua
Acido etilendiamminotetraacetico sale disodico diidrato (EDTA)Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAE5134
HyperSense Dynamic Nuclear PolarizerOxford Instruments, Abingdon, Regno UnitoInclude quanto segue: software "DNP-NMR Polarizer" utilizzato per controllare e monitorare l'intero polarizzatore DNP; "RINMR" utilizzato per monitorare i livelli di polarizzazione dello stato solido; "HyperTerminal" utilizzato per comunicare il software DNP con il software RINMR che monitora il livello di polarizzazione dello stato solido. Include anche lo spettrometro da banco MQC per monitorare la polarizzazione allo stato liquido in combinazione con il proprio software RINMR
MATLAB R2017bMathWorks, Natick, MAInclude script per l'adattamento non lineare del decadimento della magnetizzazione nel tempo e l'analisi NMRD T1 dell'acido piruvico iperpolarizzato.
OX063 Radicale triarilmetilicoOxford Instruments, Abingdon, pHmetro del Regno Unito
- SympHonyVWR International, Mississauga, ON., CanadaSB70P
ProHanceBracco Diagnostics Inc.Gadoteridol, etanolo puro Gd-HP-DO3A
(puro al 100%),alcoli commerciali, Toronto, ON, CanadaP016EAAN
bobinasviluppato internamente
Cloruro di sodioSigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAS7653
Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAS8045 
SpinMaster FFC2000 1T C/DCStelar s.r.l., Mede (PV) ItaliaInclude il software "AcqNMR" che viene utilizzato per impostare i parametri sperimentali, monitorare la sintonizzazione e l'abbinamento della bobina RF, caricare diverse sequenze di impulsi, calibrare l'angolo di inversione, l'acquisizione dei dati e l'adattamento della curva, tra le altre funzioni. Include anche un profondimetro, alcuni pesi e un tappo di profondità.
Cristalli preimpostati Trizma (pH 7,6)Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAT7943
deionizzata di spessore Idrossido di sodio

Riferimenti

  1. Golman, K., Zandt, R. I., Lerche, M., Pehrson, R., Ardenkjaer-Larsen, J. H. Metabolic imaging by hyperpolarized 13C magnetic resonance imaging for in vivo tumor diagnosis. Cancer Research. 66 (22), 10855-10860 (2006).
  2. Witney, T. H., Brindle, K. M.

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Ristampe e permessi

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