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Articolo metodologico

Focalizzata la litografia del fascio ionico per esacire di nano-architetture nei microelettrodi

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DOI:

10.3791/60004

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19 gennaio 2020

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In questo articolo

Sommario

Abbiamo dimostrato che l'incisione della nano-architettura nei dispositivi intracorticali di microelettrodi può ridurre la risposta infiammatoria e ha il potenziale per migliorare le registrazioni elettrofisiologiche. I metodi descritti qui delineano un approccio per incidere le nano-architetture nella superficie di microelettrodi intracorticali in silicio a stilo non funzionali e funzionali.

Abstract

Con i progressi nell'elettronica e nella tecnologia di fabbricazione, i microelettrodi intracorticali hanno subito miglioramenti sostanziali che hanno permesso la produzione di microelettrodi sofisticati con maggiore risoluzione e capacità ampliate. I progressi nella tecnologia di fabbricazione hanno sostenuto lo sviluppo di elettrodi biomimetici, che mirano a integrarsi senza soluzione di continuità nel parenchyma cerebrale, ridurre la risposta neuroinfiammatoria osservata dopo l'inserimento degli elettrodi e migliorare la qualità e longevità delle registrazioni elettrofisiologiche. Qui descriviamo un protocollo per impiegare un approccio biomimetico recentemente classificato come nano-architettura. L'uso della litografia del fascio ionico focalizzato (FIB) è stato utilizzato in questo protocollo per incidere specifiche caratteristiche nano-architettoniche nella superficie di microelettrodi intracorticali a singolo gambo non funzionali e funzionali. L'incisione di nano-architetture nella superficie dell'elettrodo ha indicato possibili miglioramenti della biocompatibilità e della funzionalità del dispositivo impiantato. Uno dei vantaggi dell'utilizzo di FIB è la possibilità di incidere su dispositivi fabbricati, al contrario durante la fabbricazione del dispositivo, facilitando possibilità illimitate di modificare numerosi dispositivi medici dopo la produzione. Il protocollo qui presentato può essere ottimizzato per vari tipi di materiali, funzionalità di nano-architettura e tipi di dispositivi. L'aumento della superficie dei dispositivi medici impiantati può migliorare le prestazioni del dispositivo e l'integrazione nel tessuto.

Introduzione

I microelettrodi intracorticali (IME) sono elettrodi invasivi che forniscono un mezzo di interfacciamento diretto tra dispositivi esterni e le popolazioni neuronali all'interno della corteccia cerebrale1,2. Questa tecnologia è uno strumento inestimabile per registrare i potenziali di azione neurale per migliorare la capacità degli scienziati di esplorare la funzione neuronale, far progredire la comprensione delle malattie neurologiche e sviluppare potenziali terapie. Il microelettrodo intracorticale, utilizzato come parte dei sistemi HMI (Brain Machine Interface), consente la registrazione dei potenziali d'azi....

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Protocollo

NOTA: Effettuare le seguenti operazioni indossando l'attrezzatura protettiva personale appropriata, ad esempio un camice da laboratorio e guanti.

1. Sonda di silicone non funzionale per litografia del fascio ionico focalizzato (FIB)

NOTA: Per la procedura completa che descrive la fabbricazione del wafer SOI con le 1.000 sonde, si prega di fare riferimento a Ereifej et al.39.

  1. Isolare una striscia di 2-3 sonde di silicio dal wafer in silicio sull'isolante (SOI) contenente 1.000 sonde. Non fare strisce contenenti più di tre sonde in silicio. Ciò può aumentare le probabilità di monta....

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Risultati

FIB Inciso Nano-architettura sulle superfici di sonde intracorticali singolo Shank
Utilizzando i metodi descritti qui, le sonde intracorticali sono state incise con nano-architetture specifiche seguendo protocolli stabiliti39. Le dimensioni e la forma del progetto nano-architettura descritto in questi metodi sono state implementate dai precedenti risultati in vitro che illustrano una diminuzione della reattività delle cellule gliali quando coltivate con il progetto nano-archite.......

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Discussione

Il protocollo di fabbricazione qui descritto utilizza la litografia focalizzata del fascio ionico per eguagliare in modo efficace e riproducibile nano-architetture nella superficie di microelettrodi in silicio a gambo singolo non funzionale e funzionale. La litografia del fascio ionico focalizzato (FIB) consente l'ablazione selettiva della superficie del substrato utilizzando un fascio ionico a fuoco fine50,51. FIB è una tecnica di scrittura diretta che può produ.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto dal Dipartimento dei Veterani per la Ricerca e lo Sviluppo del Dipartimento degli Affari Veterani: #RX001664-01A1 (CDA-1, Ereifej) e #RX002628-01A1 (CDA-2, Ereifej). I contenuti non rappresentano le opinioni del Dipartimento degli Affari Veterani degli Stati Uniti o del Governo degli Stati Uniti. Gli autori desiderano ringraziare FEI Co. (Ora parte di Thermofisher Scientific) per l'assistenza del personale e l'uso della strumentazione, che ha aiutato a sviluppare gli script utilizzati in questa ricerca.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Headstage ZIF-Clip a 16 canaliTucker Davis TechnologiesZC16Potrebbe essere necessario sostituire l'headstage e il supporto dell'headstage, a seconda dell'elettrodo utilizzato. https://www.tdt.com/zif-clip-digital-headstages.html
1 metro di cavo, TUTTO avvolto a mollaThomas Scientific1213F04Qualsiasi capsula di Petri non trattata sarà sufficiente. https://www.thomassci.com/Laboratory-Supplies/Cell-Culture-Dishes/_/Non-Treated-Petri-Dishes?q=petri%20dish%20cell%20culture
32-Channel ZIF-Clip Headstage Holder TuckerDavis TechnologiesZ-ROD32Potrebbe essere necessario sostituire l'headstage e il supporto dell'headstage, a seconda dell'elettrodo utilizzato. https://www.tdt.com/zif-clip-digital-headstages.html
Acetone, Diluente/Estensore/Detergente, 30mlTed Pella16023https://www.tedpella.com/SEMmisc_html/SEMpaint.htm#anchor16062
Baby-Mixter HemostatFine Science Tools13013-14Qualsiasi emostatico curvo sarà sufficiente. https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Hemostats/Baby-Mixter-Hemostat
Nastro conduttivo in carbonio, doppio rivestimentoTed Pella16084-7Il protocollo suggeriva tre opzioni per il montaggio dell'elettrodo funzionale sul tronchetto di alluminio (nastro conduttivo in rame o carbonio o una clip a basso profilo). Nel nostro studio abbiamo utilizzato il nastro conduttivo in carbonio. https://www.tedpella.com/semmisc_html/semadhes.htm
Corning Costar Piastre a Pozzetti Multipli Non Trattate - 6 pozzettiSigma AldrichCLS3736-100EAQualsiasi piastra a 6 pozzetti non trattata sarà sufficiente. https://www.sigmaaldrich.com/catalog/substance/
Dumont #5 Fine ForcepsFine Science Tools11251-30O questa pinza fine o la pompa a vuoto saranno sufficienti. https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Dumont-Forceps/ Dumont-5-Forceps/11251-30
Etanolo, 190 proof (95%), USP, Decon LabsFisher Scientific22-032-600Qualsiasi etanolo al 95% sarà sufficiente. https://www.fishersci.com/shop/products/ethanol-190-proof-95-usp-decon-labs-10/22032600
Filtrocellulare FalconFisher Scientific08-771-1https://www.fishersci.com/shop/products/falcon-cell-strainers-4/087711
FEI, Tescan, Zeiss (anche per Philips, Leo, Cambridge, Leica, CamScan), alluminio, bordo scanalato, Ø 32mmTed Pella16148A seconda della macchina SEM utilizzata, potrebbe essere necessario un mozzicone di dimensioni diverse. https://www.tedpella.com/SEM_html/SEMpinmount.htm#_16180
Fisherbrand Foglio di alluminio, rotolo a scartamento standardFisher Scientific01-213-101Qualsiasi foglio di alluminio sarà sufficiente. https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-aluminum-foil-7/p-306250
Fisherbrand Piastre di Evaporazione in PTFE Bassa e AltaScientific02-617-149Qualsiasi piastra in teflon sarà sufficiente, questa viene utilizzata per asciugare le sonde dopo il lavaggio su una superficie su cui non si attaccheranno. https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-low-tall-form-ptfe-evaporating-dishes-12/p-88552
Elettrodo funzionale in silicone stile MichiganNeuroNexusA1x16-3mm-100-177http://neuronexus.com/electrode-array/a1x16-3mm-100-177/
Modello 1772 Supporto universaleKOPFModello 1772Altri telai stereotassici e accessori saranno sufficienti. http://kopfinstruments.com/ prodotto/modello-1772-holder-universale/
Modello 900-U Strumento stereotassico per piccoli animaliKOPFModello 900-UAltri telai stereotassici e accessori saranno sufficienti. http://kopfinstruments.com/product/model-900-small-animal-stereotaxic-instrument1/
Modello 960 Manipolatore di elettrodi con gruppo slitta APKOPFModello 960Altri telai stereotassici e accessori saranno sufficienti. http://kopfinstruments.com/product/model-1772-universal-holder/
Parafilm M 10cm x 76.2m (4" x 250')Ted Pella807-5https://www.tedpella.com/grids_html/807-2.htm
PELCO Vacuum Pick-Up System, 220VTed Pella520-1-220Sia questa pompa a vuoto che le pinze fini saranno sufficienti. http:// www.tedpella.com/grids_html/Vacuum-Pick-Up-Systems.htm#anchor-520
PELCO Vernice Conduttiva ArgentoTed Pella16062https://www.tedpella.com/SEMmisc_html/SEMpaint.htm#anchor16062
SEM FIB FEI Helios 650 NanolabThermo Fisher ScientificHelios G2 650Questo è il fascio ionico focalizzato specifico e il microscopio elettronico a scansione utilizzati nel protocollo. Il software Nanobuilder è ciò di cui viene fornito. Se viene utilizzato uno strumento FIB diverso, potrebbe non essere completamente compatibile con il protocollo, in particolare con i passaggi che richiedono il software Nanobuilder. https://www.fei.com/products/dualbeam/helios-nanolab/
Fisher

Riferimenti

  1. Salcman, M., Bak, M. J. A new chronic recording intracortical microelectrode. Medical and Biological Engineering. 14 (1), 42-50 (1976).
  2. Im, C., Seo, J. -M. A review of electrodes for the electrical brain signal recording. Biomedical Engineering Letters<....

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Ristampe e permessi

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