Control microbiano y estrategias de monitoreo para ambientes de salas limpias y terapias celulares
Summary
El protocolo resume las mejores prácticas para minimizar la carga biológica microbiana en un entorno de sala limpia e incluye estrategias como el monitoreo ambiental, el monitoreo de procesos y las pruebas de esterilidad del producto. Es relevante para las instalaciones de fabricación y prueba que deben cumplir con los estándares actuales de buenas prácticas de tejidos y los estándares actuales de buenas prácticas de fabricación.
Abstract
Un programa holístico y bien validado que incorpore batas robustas, limpieza, monitoreo ambiental y medidas de monitoreo de personal es fundamental para minimizar la carga biológica microbiana en las salas de fabricación de terapia celular y los laboratorios de pruebas correspondientes para garantizar que las instalaciones operen en un estado de control. Garantizar la seguridad del producto a través de medidas de control de calidad, como las pruebas de esterilidad, es un requisito reglamentario tanto para las células, tejidos y productos celulares y a base de tejidos (HCT/Ps) mínimamente manipulados (sección 361) como para los más que mínimamente manipulados (artículo 351). En este video, proporcionamos una guía paso a paso sobre cómo desarrollar e incorporar las mejores prácticas asépticas para operar en un entorno de sala limpia, incluyendo batas, limpieza, puesta en escena de materiales, monitoreo ambiental, monitoreo de procesos y pruebas de esterilidad del producto utilizando inoculación directa, proporcionada por la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) y el Método Alternativo de Prueba de Esterilidad de los Institutos Nacionales de Salud (NIH). Este protocolo pretende ser una guía de referencia para los establecimientos que se espera que cumplan con las buenas prácticas de tisú actuales (cGTP) y las buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP).
Introduction
La implementación de un sólido programa de monitoreo microbiano a través del monitoreo ambiental (EM), monitoreo de procesos y pruebas de esterilidad del producto es un requisito regulatorio para las buenas prácticas tisulares actuales (cGTP) y las buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP) en laboratorios de terapia celular1. Además, la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) espera que el laboratorio que realiza las pruebas de control de calidad (QC) del producto también emplee instalaciones y controles comparables a los utilizados para las operaciones de llenado aséptico2.
Este protocolo tiene cuatro secciones principales: 1) Prácticas asépticas, incluyendo bata de personal, limpieza y puesta en escena de materiales; 2) EM, incluidos los cultivos viables de aire y superficie y el monitoreo de partículas en el aire no viable; 3) monitoreo del proceso, incluidas las placas de sedimentación y el muestreo de la punta de los dedos enguantados; y 4) pruebas de esterilidad del producto a través de la farmacopea compendial de los Estados Unidos (USP) método3 o el método alternativo de prueba de esterilidad4 de los NIH. Cuando se usan juntas, estas medidas pueden ser un método eficaz para garantizar que una instalación permanezca en un estado de control.
Las técnicas descritas aquí no son novedosas; Sin embargo, los estándares actuales de los reguladores y las organizaciones profesionales carecen de detalles, lo que ha llevado a la ausencia de monitoreo microbiano o la implementación de prácticas no estandarizadas, particularmente en centros académicos donde la fabricación in situ y las pruebas de esterilidad del producto están emergiendo a un ritmo rápido 1,5,6 . Este protocolo se puede utilizar como guía para crear un programa de monitoreo y control microbiano que cumpla con los requisitos reglamentarios cuando se usa junto con la validación del usuario final y las evaluaciones de riesgos.
Protocol
Representative Results
Discussion
Hay varias áreas críticas en este protocolo, incluido el mantenimiento de la técnica aséptica y el flujo de aire unidireccional dentro de las salas limpias y los BSC. Las mejores prácticas incluyen moverse lenta y deliberadamente para minimizar la turbulencia. Las manipulaciones asépticas deben realizarse desde el lado del producto, no desde arriba. Se recomienda el procesamiento de sistemas cerrados y el uso de materias primas esterilizadas terminalmente. Se debe evitar hablar en áreas críticas y apoyarse contra…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por el Programa de Investigación Intramuros del Centro Clínico de los Institutos Nacionales de Salud. El contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa los puntos de vista oficiales de los Institutos Nacionales de Salud.
Materials
| 20-25°C Incubator | Lab preference | ||
| 30-35°C Incubator | Lab preference | ||
| Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
| BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
| Beard cover | Lab preference | ||
| Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
| Cleanroom shoes | Lab preference | ||
| Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
| Hypodermic needle | Lab preference | ||
| iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetic head | Lab preference | ||
| Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Lab preference | ||
| Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
| Non-sterile gloves | Lab preference | ||
| Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
| Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
| Parafilm | Lab preference | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastic bag | Lab preference | ||
| Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
| Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
| Safety glasses | Lab preference | ||
| Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
| Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile face mask | Lab preference | ||
| Sterile gloves | Lab preference | ||
| Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
| Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
| Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile syringe | Lab preference | ||
| Tacky mats | Lab preference | ||
| Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Lab preference | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab preference |
Riferimenti
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