Stratégies de contrôle et de surveillance microbiens pour les environnements de salle blanche et les thérapies cellulaires
Summary
Le protocole résume les pratiques exemplaires pour minimiser la charge microbienne dans un environnement de salle blanche et comprend des stratégies telles que la surveillance environnementale, la surveillance des procédés et les tests de stérilité des produits. Elle est pertinente pour les installations de fabrication et d’essai qui sont tenues de respecter les normes actuelles de bonnes pratiques tissulaires et les normes actuelles de bonnes pratiques de fabrication.
Abstract
Un programme holistique et bien validé qui intègre de solides mesures de habillage, de nettoyage, de surveillance environnementale et de surveillance du personnel est essentiel pour minimiser la charge microbienne dans les salles de fabrication de thérapies cellulaires et les laboratoires d’essais correspondants afin de s’assurer que les installations fonctionnent dans un état de contrôle. Assurer la sécurité des produits au moyen de mesures de contrôle de la qualité, comme les tests de stérilité, est une exigence réglementaire pour les cellules, les tissus et les produits cellulaires et tissulaires (HCT/Ps) manipulés de façon minimale (article 361) et plus que les produits à manipulation minimale (article 351). Dans cette vidéo, nous fournissons un guide par étapes sur la façon de développer et d’intégrer les meilleures pratiques aseptiques pour fonctionner dans un environnement de salle blanche, y compris l’habillage, le nettoyage, la mise en scène des matériaux, la surveillance environnementale, la surveillance des processus et les tests de stérilité des produits par inoculation directe, fournis par la United States Pharmacopeia (USP) et la méthode alternative de test de stérilité des National Institutes of Health (NIH). Ce protocole se veut un guide de référence pour les établissements qui doivent respecter les bonnes pratiques tissulaires actuelles (BPTc) et les bonnes pratiques de fabrication (BPFc).
Introduction
La mise en œuvre d’un solide programme de surveillance microbienne au moyen de la surveillance environnementale (ME), de la surveillance des procédés et des tests de stérilité des produits est une exigence réglementaire pour les bonnes pratiques tissulaires actuelles (BPTc) et les bonnes pratiques de fabrication actuelles (BPFc) dans les laboratoires de thérapie cellulaire1. De plus, la Food and Drug Administration (FDA) des États-Unis s’attend à ce que le laboratoire effectuant les tests de contrôle de la qualité (CQ) du produit utilise également des installations et des contrôles comparables à ceux utilisés pour les opérations de remplissage aseptique2.
Ce protocole comporte quatre sections principales : 1) les pratiques aseptiques, y compris l’habillage, le nettoyage et la mise en scène des matériaux; 2) EM, y compris les cultures viables dans l’air et la surface et la surveillance de l’air par particules non viables; 3) la surveillance des procédés, y compris les plaques de décantation et l’échantillonnage du bout des doigts gantés; et 4) les tests de stérilité des produits effectués selon la méthode3 officinale de la United States Pharmacopeia (USP) oula méthode 4 des tests de stérilité alternative des NIH. Lorsqu’elles sont utilisées ensemble, ces mesures peuvent constituer une méthode efficace pour s’assurer qu’une installation demeure sous contrôle.
Les techniques décrites ici ne sont pas nouvelles; Cependant, les normes actuelles des organismes de réglementation et des organisations professionnelles manquent de détails, ce qui a entraîné une absence de surveillance microbienne ou la mise en œuvre de pratiques non normalisées, en particulier dans les centres universitaires où la fabrication sur place et les tests de stérilité des produits émergent à un rythme rapide 1,5,6 . Ce protocole peut servir de guide pour créer un programme de surveillance et de contrôle microbiens qui répond aux exigences réglementaires lorsqu’il est utilisé conjointement avec la validation par l’utilisateur final et l’évaluation des risques.
Protocol
Representative Results
Discussion
Ce protocole comporte plusieurs domaines critiques, notamment le maintien de la technique aseptique et du flux d’air unidirectionnel dans les salles blanches et les ESB. Les meilleures pratiques comprennent le déplacement lent et délibéré pour minimiser les turbulences. Les manipulations aseptiques doivent être effectuées du côté du produit, et non d’en haut. Le traitement en système fermé et l’utilisation de matières premières stérilisées au stade terminal sont recommandés. Il faut éviter de parler…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par le programme de recherche intra-muros du National Institutes of Health Clinical Center. Le contenu relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représente pas les opinions officielles des National Institutes of Health.
Materials
| 20-25°C Incubator | Lab preference | ||
| 30-35°C Incubator | Lab preference | ||
| Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
| BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
| Beard cover | Lab preference | ||
| Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
| Cleanroom shoes | Lab preference | ||
| Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
| Hypodermic needle | Lab preference | ||
| iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetic head | Lab preference | ||
| Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Lab preference | ||
| Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
| Non-sterile gloves | Lab preference | ||
| Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
| Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
| Parafilm | Lab preference | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastic bag | Lab preference | ||
| Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
| Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
| Safety glasses | Lab preference | ||
| Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
| Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile face mask | Lab preference | ||
| Sterile gloves | Lab preference | ||
| Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
| Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
| Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile syringe | Lab preference | ||
| Tacky mats | Lab preference | ||
| Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Lab preference | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab preference |
Riferimenti
- Cundell, T., Atkins, J. W., Lau, A. F. Sterility testing for hematopoietic stem cells. Journal of Clinical Microbiology. , (2023).
- United States Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing – Current Good Manufacturing Practice. United States Food and Drug Administration. , (2004).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<71> Sterility Tests in USP43-NF38. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2022).
- England, M. R., Stock, F., Gebo, J. E. T., Frank, K. M., Lau, A. F. Comprehensive evaluation of compendial USP<71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for detection of product sterility testing contaminants. Journal of Clinical Microbiology. 57 (2), 01548 (2019).
- Gebo, J. E. T., East, A. D., Lau, A. F. A side-by-side comparison of clinical versus current good manufacturing practices (cGMP) microbiology laboratory requirements for sterility testing of cellular and gene therapy products. Clinical Microbiology Newsletter. 43 (21), 181-191 (2021).
- Gebo, J. E. T., Lau, A. F. Sterility testing for cellular therapies: What is the role of the clinical microbiology laboratory. Journal of Clinical Microbiology. 58 (7), 01492 (2020).
- International Organization for Standardization. ISO 14644-1:2015 Cleanrooms and associated controlled environments – Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration. International Organization for Standardization. , (2015).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 13 Revised 2022 (TR 13) Fundamentals of an Environmental Monitoring Program. Parenteral Drug Association, Inc. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1116> Microbiological Evaluation of Cleanrooms and Other Controlled Environments in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Guinet, R., et al. Multicenter study on incubation conditions for environmental monitoring and aseptic process simulation. PDA journal of pharmaceutical science and technology. 71 (1), 43-49 (2017).
- Gordon, O., Berchtold, M., Staerk, A., Roesti, D. Comparison of different incubation conditions for microbiological environmental monitoring. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 68 (5), 394-406 (2014).
- Anders, H. J., et al. Multisite qualification of an automated incubator and colony counter for environmental and bioburden applications in pharmaceutical microbiology. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1072> Disinfectants and Antiseptics. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1071> Rapid Microbial Tests for Release of Sterile Short-Life Products: A Risk-Based Approach in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. PUSP<1223> Validation of Alternative Microbiological Methods in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 33, Revised 2013 (TR 33) Evaluation, Validation and Implementation of Alternative and Rapid Microbiological Methods. Parenteral Drug Association, Inc. , (2013).
- Putnam, N. E., Lau, A. F. Comprehensive study identifies a sensitive, low-risk, closed-system model for detection of fungal contaminants in cell and gene therapy products. Journal of Clinical Microbiology. 59 (11), 0135721 (2021).
- Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation. Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products Annexes (PE 009-16 (Annexes)). Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation Scheme. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<825> Radiopharmaceuticals – Preparation, Compounding, Dispensing, and Repackaging in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
