Summary
Detta protokoll beskriver en metod för att mäta tryck och volym i vänster kammare med hjälp av tryck-volymkonduktanstekniken. Metoden gör det möjligt att kontinuerligt följa upp läkemedels effekter på hjärtat i realtid.
Abstract
Nedsatt hjärtfunktion kan ha en negativ inverkan på andra organ. Förhållandet mellan tryck och volym i vänster kammare anses vara en giltig metod för att utvärdera hjärtfunktionen. Realtidsövervakning av hjärtfunktionen är viktig för läkemedelsutvärdering. Under stängda bröstkorgsförhållanden kommer miniatyrgivaren, som är en viktig komponent i tryck-volymkatetern, in i råttans vänstra kammare genom den högra halspulsådern. Enheten visualiserar förändringarna i hjärtfunktionen under experimentet i form av en tryck-volymslinga. Den faktiska volymen av ventrikeln beräknas genom att ändra blodets ledningsförmåga genom att injicera 50 μL av en 20-procentig natriumkloridlösning i råttans vänstra halsven. Den faktiska volymen av råttans kammarhåla beräknas genom att mäta blodets konduktivitet i en känd volym med hjälp av en tryck-volym-konduktanskateter. Detta protokoll möjliggör kontinuerlig observation av effekterna av läkemedel på hjärtat och kommer att främja den logiska grunden för användningen av etniska specialläkemedel vid hjärt-kärlsjukdom.
Introduction
Hjärt- och kärlsjukdomar har den högsta dödligheten i världen1. Dess orsaker inkluderar kranskärlsstenos (myokardiell ischemi), kranskärlsblockering (hjärtinfarkt) och ischemi-reperfusionsskada2. Eftersom hjärtat befinner sig i en konstant systolisk och diastolisk cykel är det en av de mest energikrävande delarna av kroppen. Därför, när kranskärlen har svårt att upprätthålla tillräckligt med energi och syre, minskar hjärtfunktionen oundvikligen, vilket har en negativ inverkan på andra organ 3,4. Hjärtat är ett kraftpaket i cirkulationssystemet och hjärtfunktionen måste bedömas rationellt.
Bedömning av hjärtfunktion genom kammartryck och volymsamband anses vara en heltäckande metod5. Förändringar i realtid i ventrikulärt tryck och volym under hela hjärtcykeln utgör tryck-volym-loopen. Den ventrikulära tryck-volymslingan möjliggör kvantitativ analys av hjärtfunktion och reservkapacitet i termer av olika faser och energier i kammaren. Den normala kammaren har en liten slutsystolisk volym med bra slagarbete och effektivitet 5,6,7.
Tryck-volymledningskatetertekniken är en invasiv metod för att detektera status i vänster kammare. Den kan användas för att erhålla en kontinuerlig tryck-volymslingai realtid 8. Tryckvolymetriska konduktivitetskatetrar är kraftfulla verktyg, och ljudhanteringsprocedurer är avgörande för reproducerbara och tillförlitliga resultat, inklusive in vivo-analys av myokardparallell konduktivitet under koksaltskalibrering och in vitro-mätning av blodkonduktivitet vid kyvettkalibrering3.
Ferulinsyra (FA), en fenolsyra, är utbredd i växtriken som Avena sativa och Ligusticum chuanxiong hort 9,10. Ferulinsyra har farmakologiska effekter genom att sänka blodtrycket och arytmi. FA är en bioaktiv naturprodukt med flera funktioner. FA kan motstå oxidativ skada, minska inflammatoriska reaktioner, hämma trombocytaggregation och förhindra kranskärlssjukdom och åderförkalkning11. De flesta studier på ferulsyra har dock fokuserat på en aspekt av hjärtat och sällan har effekterna av ferulsyra utvärderats i cirkulationssystemet 12,13,14,15. Här beskriver vi en sluten bröstanestesi för isoflurananestesi i kombination med Ketamin (50 mg/kg) med fokus på hjärtats svar på ferulsyralösning under jugularveninjektion.
Vi kommer att beskriva hela proceduren för att använda verktyget under förhållanden med sluten bröstkorg, inklusive beredning av lösning, förberedelse av givaren, förexperimentell råttförberedelse, kateterinsättning i höger halspulsåder och dataanalys. Experimentets varaktighet är vanligtvis mindre än 4 timmar och bestäms av de olika experimentprotokollen. I ett enda experiment kan vi få detaljerad hjärtinformation som vänsterkammartryck, volym och hjärtfrekvens.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Djurprotokollet granskades och godkändes av Chengdu University of Traditional Chinese Medicine Experimental Animal Welfare Ethics Committee (Record No. 2023-04). Hanråttor av typen Sprague Dawley (280 ± 20 g, 8-10 veckor gamla) användes i den aktuella studien. Råttorna hölls i en djurkammare och var fria att dricka och äta.
1. Beredning av lösningen
- Förbered 0.9 % NaCl-lösning som ska användas för att hålla arbetsområdet tillräckligt fuktigt.
- För att bereda 20% hyperton NaCl-lösning, lös 2 g NaCl i 10 ml dubbeldestillerat vatten (ddH2O). För att bestämma myokardiumets parallella konduktivitet är det nödvändigt att ändra konduktiviteten hos den intraventrikulära vätskan.
- Förbered 1 % enzymaktiv pulveriserad tvättmedelslösning. Använd detta vid slutet av experimentet, för att sänka ner den elektriska tryck-volymkatetern i lösningen i 1-2 timmar.
- Bered FA-lösning genom att lösa 10 mg ferulsyra i 20 ml ddH2O. Filtrera lösningen genom ett 0,22 μm membran. Injicera råttan med 1 ml/kg ferulsyralösning.
2. Förberedelse av sensorn
- Sänk ner tryck-volymsensorn i 0,9 % NaCl-lösning vid 37 °C i cirka 30-60 minuter före experimentets start, vilket underlättar stabiliteten hos experimentella data.
- Anslut experimentapparaten. Systemet för mätning av tryck-volymslingor består av en tryck-volym-kateter, två styrenheter, en registreringsenhet och programvara som körs av datorn. Tryck-volym-loopmodulen i programvaran kommer att tillhandahålla en referensexperimentell procedur.
- Tryck på Start-knappen så registrerar programvaran automatiskt övervakningsdata från tryck-volymsensorn.
- Använd programvaran Miro-Tip Pressure Volume (MPVS) för att kalibrera trycket och konduktiviteten.
3. Förberedelse av råttor före försök
- Administrera ketamin (50 mg/kg) och fentanyl (0,25 mg/kg) till råttorna via intramuskulär injektion5.
- Nyp ihop tårna på råttorna för att verifiera anestesidjupet genom frånvaro av reflexer. Känslor påverkar råttornas fysiologiska tillstånd och smärta orsakar förändringar i hjärtfunktionen16. Använd rakapparater för smådjur och hårborttagningskrämer för att ta bort hår på operationsställen. Använd jodofor och 75 % alkohol för att torka huden för att bibehålla steriliteten.
- Immobilisera helt sövda råttor på en isotermisk värmeplatta med baksidan i kontakt med värmeplattan.
- Sätt in en temperatursond belagd med vaselin i råttans ändtarm. Håll råttkroppstemperaturen på 37 °C ± 0.5 genom att justera värmeplattan.
OBS: Det är nödvändigt att hålla luftvägarna fria under experimentet.
4. Kateterinsättning i höger halspulsåder
- Snitta huden på höger sida av medianlinjen på råtthalsen, längsgående. Gör ett snitt på 4 cm och separera muskel och bindväv med pincett. Halspulsådern som ligger på höger sida av luftstrupen är synlig. Råttans högra halspulsåder är mörkröd, starkt pulserande och har en vit vagusnerv parallell med den.
- Separera halspulsådern från andra vävnader och nerver med hjälp av en pincett. Placera tre 5-0 kirurgiska linjer under den rena halspulsådern. Droppa steril 0,9 % natriumkloridlösning på operationsområdet för att bibehålla fuktningen av halspulsådern.
- Skär av huden ovanför vänster nyckelben och dra av vävnaden runt halsvenen. Placera sedan en 5-0 kirurgisk tråd under den vänstra halsvenen.
- Använd artärklämmor för att stänga av blodflödet proximalt, med hjälp av en mikrosax för att klippa en sektion i kärlet där blodflödet har stannat. Det är normalt att en liten mängd blod dyker upp i sårtvärsnittet. Om blod lämnar kärlet snabbt och intermittent, lyft den proximala kirurgiska linjen och applicera artärklämman igen.
- För in katetern från tvärsnittet längs halspulsådern djupt in i vänster kammare. Se till att det lägsta systoliska tryckvärdet efter att ha kommit in i vänster kammare är nära 0 mmHg.
- För att få ett rimligt förhållande mellan tryck och volym justerar du tryck-volymkatetern i kammarkammaren något. För att förhindra massiv blodförlust och att katetern ändrar position på grund av hjärtslag, ligera den proximala änden av operationslinjen.
OBS: Råttans kroppstemperatur, anestesinivå, trycksignal och konduktanssignal bör förbli stabila under denna process. Råttans luftvägar ska hållas öppna.
5. Läkemedelsinjektion och konduktivitetskalibrering
- Behåll tryckvolymkateterns position i kammarkammaren, efter att data stabiliserats, ligera operationsslangen distalt om halsvenen ligerad och injicera långsamt upp till 1 ml/kg ferulsyralösning. Observera i 5-10 min.
- Injicera 50 μL 20 % NaCl-lösning från vänster halsven för att avlägsna den parallella konduktansen som genereras av myokardiumet. Volymområdet för den parallella konduktansen var cirka 130-280 μL5. Upprepa detta 3 gånger med 2 minuters mellanrum.
- Efter ventrikulärt tryck och volymtest på råttor, ta blod från råttans bukaorta med hjälp av en bloduppsamlingsnål. Placera det uppsamlade blodet i ett natriumheparinuppsamlingsrör och vänd upp och ner 2x för att förhindra att blodet koagulerar. Avliva försöksråttorna genom att injicera 120 mg/kg pentobarbitalnatrium genom vänster halsven.
- Utför omvandling av uppmätt konduktans till faktisk blodvolym med hjälp av råttvolymkalibreringsrör. Placera blod blandat med natriumheparin, sekventiellt, i kalibreringsrörets öppningar, och katetern detekterar blodets konduktansvärden i de olika öppningarna och registrerar dem i tryck-volymövervakningsmodulen.
6. Analys av data
- Genom att lägga till det uppmätta konduktivitetsvärdet för en känd blodvolym till den angivna platsen plottar programvaran automatiskt kurvan och extrapolerar blodets konduktivitet. Använd minst tre uppsättningar blodkonduktivitetsvärden för att härleda blodledningsförmågan hos råttan som testas. Blodets konduktivitet är individualiserad. För varje råtta under testet, utför denna procedur individuellt.
- Hyperton kalibrering: Genom att lägga till data som erhållits från tre injektioner av hyperton koksaltlösning till en specificerad plats, beräknar programvaran parallella konduktansmedelvärden och kalibrerar automatiskt experimentella data.
- Använd regioner med stabilt blodtryck och konduktansvärden för att analysera den vänstra kammarfunktionen hos råttor.
- Klicka på Analysera så kommer programvaran automatiskt att beräkna en mängd olika parametrar baserat på det valda området, inklusive EF (ejektionsfraktioner för vänster kammare), SW (strokearbete) och CO (hjärtminutvolym) etc.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Varje test (n = 3) baserades på att en tryck-volym-konduktivitetskateter fördes in i vänster kammare. Det finns signifikanta signalförändringar, såsom en markant ökning av tryckområdet, när katetern kommer in i vänster kammare från halspulsådern (Figur 1). Grafisk analys av förhållandet mellan tryck och volym kompletteras genom att plotta volymen (μL) på Y-axeln och trycket (mmHg) på X-axeln. Trycket i vänster kammare på råtta låg inom 10-105 mmHg och konduktansvärdena för volymen låg inom 65-115 μL.
Hela hjärtcykeln bildas av tryck-volymslingan moturs (figur 2). Signifikanta förändringar i hjärtfunktionen observerades hos råttor efter att de fått ferulsyra (figur 3). Trycket i vänster kammare på råtta låg inom 0-85 mmHg och konduktansvärdena för volymen låg inom 30-100 μL.
Som visas i figur 4 sker förändringar i tryck-volymslingan i vänster kammare när hyperton koksaltlösning injiceras i halsvenen hos råtta. På grund av den direkta mätningen av tryck- och konduktivitetssignaler i kammarhålan kan injektion av hyperton koksaltlösning genom vänster halsven orsaka en ökning av konduktivitetsvärdena. Störningar från myokardium kan elimineras genom att göra flera mätningar av förändringarna i konduktivitetsvärdena.
Tryckvolymetrisk konduktans användes för kyvettkalibrering (figur 5). Detta för att omvandla de uppmätta konduktansvärdena till volymetriska.
Figur 1: Olika tryck-volymslingor i halspulsådern och ventrikeln som skapas av tryck-volymkonduktivitetskatetrar. (A) Det finns signifikanta skillnader i tryck och konduktivitet mellan artärer och kammare. (B) Införandet av en miniatyrsensor i kammaren kan bilda en tryck-volymslinga. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Tryck-volymslinga. Tryck-volymslingan innehåller fyra faser: diastole, isovolumetrisk kontraktion, systole och isovolumetrisk relaxation. Arean av tryck-volymslingan representerar det arbete som genereras av en hjärtsammandragning. Subtrahering av den slutsystoliska volymen (ESV) från den slutdiastoliska volymen (EDV) ger den ventrikulära utgången. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Vänsterkammarfunktionen är påverkad hos råttor efter injektion av ferulsyralösning. (A) Tryck-volymslinga i vänster kammare påverkas. (B) Ejektionsfraktion (EF) representerar den procentuella andelen slagvolym i förhållande till ventrikelns slutdiastoliska volym: förändring i vänster kammares ejektionsfraktion med räkning av hjärtslag. (C) Vänsterkammarens slutsystoliska volym varierar med ökande antal hjärtslag. (D) Vänsterkammar slutdiastoliskt tryck-volymförhållande, tidskonstanta förändringar med en ökning av hjärtfrekvensen. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: Tryck- och konduktansförändringar i vänster kammare hos råttor efter att 20 % NaCl-lösning injicerats i venen. (A) Analyserade data där konduktiviteten har förändrats. (B) Tryckvolymringen förskjuts åt höger på grund av ökad konduktivitet. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 5: Konduktanskatetrar med tryck-volym används för att mäta konduktansen hos en känd volym kyvett fylld med råttblod. (A) Konduktivitet för olika volymer. (B) God korrelation mellan konduktivitet mätt med tryck-volymkonduktivitetskatetrar. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det är viktigt att anta en rationell doseringsstrategi för olika tillstånd av hjärtfunktion. Tryck-volym-konduktanskance-katetertekniken är det mest intuitiva sättet att studera vänsterkammarfunktion5. Metoden gör det möjligt att studera läkemedlens effekter på hjärtfunktionen ur ett helhetsperspektiv. Vi beskriver de olika stegen i experimentet i detalj. Detta kommer att ge en viss möjlighet att studera hjärtats funktion.
Tekniken med tryckvolymkonduktivitetskateter är den mest omfattande och rigorösa metoden. Information kan erhållas om upp till 30 indikatorer i ett enda experiment, inklusive absoluta värden (tryck och volym) och relativa värden (EF), och till och med viss information om läkemedelsmetabolism.
Råttornas kroppstemperatur bibehölls vid 37 °C ± 0,5 under hela försöksproceduren5. Blodförlust från råttor bör minimeras under försöket5. Råttans blodvolym bör noteras under experimentet17.
Tryck-volymledningskateterteknik gör det möjligt att i realtid detektera ventriklarnas status18. Denna teknik kan vara till stor hjälp för att studera effekten av ett enda läkemedel eller en kombination av läkemedel på hjärtat. Konduktanskatetern mäter direkt trycket och konduktansen i vänster kammare. Detta är nära relaterat till kroppstemperaturen och graden av anestesi hos råttan som testas. I detta experiment, efter injektion av ferulsyralösningen, påvisades förändringarna i vänsterkammarfunktionen tydligt av tryck-volym-loopen, inklusive en minskning av det slutsystoliska trycket och den slutsystoliska volymen (figur 2A). Ejektionsfraktionen för vänster kammare hos råttorna ökade signifikant, med ett toppvärde på 89,87 % (Figur 2B). Det slutsystoliska trycket i vänster kammare hos råtta reducerades signifikant, med ett minimivärde på 55,44 μL. Detta överensstämmer med den farmakologiska effekten av ferulinsyra när det gäller att sänka blodtrycket som tidigare rapporterats11.
Vissa naturliga föreningar som finns i livsmedel och medicinalväxter kan bidra till att upprätthålla hälsan. Ferulinsyra är en fenolförening som är allmänt förekommande i växter, inklusive Ligusticum chuanxiong och Angelica sinensis19, som är viktiga aktiva ingredienser i olika traditionella kinesiska mediciner. Aktuell forskning har rapporterat att ferulsyra har flera biologiska aktiviteter, inklusive antiinflammatoriska, antifibrotiska och antiapoptotiska effekter11. Det är nödvändigt att studera effekterna av denna lättillgängliga naturprodukt från mat på hjärtfunktionen i cirkulationssystemet, även om forskning har visat dess positiva effekter på hjärtats morfologiska struktur12,20.
Tryck-volymkatetern kan placeras i försöksdjurets kammare för att få kammartryck och konduktans direkt. Koksaltskalibrering och kyvettkalibrering används för att erhålla verkliga ventrikulära volymer. Detta experiment gör det möjligt att erhålla en kontinuerlig tryck-volym-slinga, som visuellt kommer att återspegla förändringar i kammarfunktionen. Det finns två metoder för att komma åt kammarkammaren med tryckvolymskatetern, inklusive öppen bröstkorg och stängd bröstkorg. Vid öppen bröstkorg är det lättare att kontrollera tryckvolymkateterns position i kammarhålan. Att mäta ventrikelfunktionen under stängda bröstkorgar kräver inte assisterad andning av djuret, är mindre skadligt för djuret och har en högre framgångsfrekvens. Dessutom observeras tryckvolymslingan under stängda bröstförhållanden för att avgöra om tryckvolymkatetern finns i kammarhålan. Om denna kateter komprimeras av myokardiumet kommer tryckvolymslingan att visa en onormal topp.
Hjärtat är ett viktigt organ som pumpar blod genom hela kroppen. Det behövs ett mer rationellt tillvägagångssätt för att utvärdera hjärtfunktionen, inklusive före och efter belastning samt själva hjärtats tillstånd21. Tryck-volymslingor används för att beskriva förändringarna i tryck och volym i den centrala kammarkammaren under hela hjärtcykeln i realtid. Detta protokoll beskriver en komplett metod för att mäta vänsterkammarfunktion med miniatyrsensorer. Genom att ändra mikrosensormodellen i det experimentella protokollet kan man mäta hjärtfunktionen hos olika djur, såsom grisar, möss etc 4,8,22. Användningen av tryck-volym-konduktanskatetrar gör det möjligt att i realtid observera effekterna av läkemedel på vänster kammares tryck och volym, såväl som den totala effekten på försökspersonens cirkulationssystem. Denna teknik hjälper till att minimera de potentiella negativa effekterna av läkemedel på hjärtat.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna förklarar att forskningen genomfördes i avsaknad av kommersiella eller finansiella relationer som skulle kunna tolkas som en potentiell intressekonflikt.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av Sichuan Provincial Major R&D Project (2022YFS043) och Chengdu University of Traditional Chinese Medicine Youth Foundation Advancement Talent Special Project (QJJJ2022029).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 mL syringe | Sartorius AG, Germany | - | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Dual Bio Amp | Millar, Inc., USA | DA-100 | |
| Enzyme-Active Powdered Detergent | Alconox Inc., USA | 1104 | |
| Ferulic acid | Macklin Biochemical Co., Ltd,Shanghai, China | F900027 | |
| Mikro-Tip Catheter Transducers, SPR-838NR | Millar, Inc., USA | SPR-838NR | |
| Millar Miro-Tip Pressure Volume (MPVS) Ultra | Millar, Inc., USA | SPR-869 | |
| Pet electric clippers | Jinyun County New Concept Home Supplies Co., Ltd. | - | |
| Power Lab 8 / 35 | Millar, Inc., USA | PL3508 | |
| Sodium Chloride, NaCl | Kelong Chemical Reagent, Chengdu, China | KX829463 | |
| Veet hair removal cream | Shanghai Songqi E-commerce Co., Ltd. | 3226470 |
References
- Zaman, R., Epelman, S. Resident cardiac macrophages: Heterogeneity and function in health and disease. Immunity. 55 (9), 1549-1563 (2022).
- Schefold, J. C., Filippatos, G., Hasenfuss, G., Anker, S. D., von Haehling, S. Heart failure and kidney dysfunction: epidemiology, mechanisms and management. Nat Rev Nephrol. 12 (10), 610-623 (2016).
- Medert, R., Bacmeister, L., Segin, S., Freichel, M., Camacho Londoño, J. E. Cardiac response to β-adrenergic stimulation determined by pressure-volume loop analysis. J Vis Exp. (171), e62057 (2021).
- Hieda, M., Goto, Y. Cardiac mechanoenergetics in patients with acute myocardial infarction: From pressure-volume loop diagram related to cardiac oxygen consumption. Heart Fail Clin. 16 (3), 255-269 (2020).
- Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
- Ziegler, T., Laugwitz, K. L., Kupatt, C. Left ventricular pressure volume loop measurements using conductance catheters to assess myocardial function in mice. Methods Mol Biol. 2158, 33-41 (2021).
- Rosch, S., et al. Characteristics of heart failure with preserved ejection fraction across the range of left ventricular ejection fraction. Circulation. 146 (7), 506-518 (2022).
- Meyers, T. A., Townsend, D. Early right ventricular fibrosis and reduction in biventricular cardiac reserve in the dystrophin-deficient mdx heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (4), H303-H315 (2015).
- Alaerts, G., et al. Exploratory analysis of chromatographic fingerprints to distinguish rhizoma Chuanxiong and rhizoma Ligustici. J Chromatogr A. 1217 (49), 7706-7716 (2010).
- Serreli, G., et al. Ferulic acid derivatives and Avenanthramides modulate endothelial function through maintenance of nitric oxide balance in HUVEC cells. Nutrients. 13 (6), 2026 (2021).
- Li, D., et al. Ferulic acid: A review of its pharmacology, pharmacokinetics and derivatives. Life Sci. 284, 119921 (2021).
- Monceaux, K., et al. Ferulic acid, Pterostilbene, and Tyrosol protect the heart from ER-stress-induced injury by activating SIRT1-dependent deacetylation of eIF2α. Int J Mol Sci. 23 (12), 6628 (2022).
- Liu, Z., et al. N-terminal truncated peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α alleviates phenylephrine-induced mitochondrial dysfunction and decreases lipid droplet accumulation in neonatal rat cardiomyocytes. Mol Med Rep. 18 (2), 2142-2152 (2018).
- Sun, Y., et al. Shuangxinfang prevents S100A9-induced macrophage/microglial inflammation to improve cardiac function and depression-like behavior in rats after acute myocardial infarction. Front Pharmacol. 13, 832590 (2022).
- Panneerselvam, L., et al. Ferulic acid attenuates arsenic-induced cardiotoxicity in rats. Biotechnol Appl Biochem. 67 (2), 186-195 (2020).
- Hsueh, B., et al. Cardiogenic control of affective behavioural state. Nature. 615 (7951), 292-299 (2023).
- Townsend, D. Measuring pressure volume loops in the mouse. J Vis Exp. (111), e53810 (2016).
- Bastos, M. B., et al. Invasive left ventricle pressure-volume analysis: overview and practical clinical implications. Eur Heart J. 41 (12), 1286-1297 (2020).
- Wang, L. Y., et al. Effects of ferulic acid on antioxidant activity in Angelicae Sinensis Radix, Chuanxiong Rhizoma, and their combination. Chin J Nat Med. 13 (6), 401-408 (2015).
- Liu, Z., et al. Ferulic acid increases intestinal Lactobacillus and improves cardiac function in TAC mice. Biomed Pharmacother. 120, 109482 (2019).
- Baan, J., et al. Continuous measurement of left ventricular volume in animals and humans by conductance catheter. Circulation. 70 (5), 812-823 (1984).
- Dam Lyhne, M., et al. Effects of mechanical ventilation versus apnea on bi-ventricular pressure-volume loop recording. Physiol Res. 71 (1), 103-111 (2022).
