È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:00Titolo
- 00:48Introduction
- 01:28Pulse-chase Labeling and Protein Extraction
- 04:34Immunoprecipitation (IP)
- 05:38Deglycosylation and Preparing the Samples for HPLCE Analysis
- 08:05Analysis of N-glycans from NIH 3T3 Glycoproteins Representative Results
- 09:24Conclusion
Biz, memeli hücrelerinde biyosentezi sonra glikoproteinler erken ömrü boyunca N-bağlı glukanlardır değişiklik analizi için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu darbe-kovalamaca metabolik etiketli glukanlardır, glikoproteinler ve HPLC ile incelenmesi enzimatik serbest analizi ile elde edilir.
Tags
Pulse-chase AnalysisN-linked Sugar ChainsGlycoproteinsMammalian CellsGlc3Man9GlcNAc2 Precursor OligosaccharideER ModificationSecretory ProteinsGlycoprotein Quality ControlTrafficking SignalsProteomic AnalysisDynamics Of Sugar Chain ProcessingLabeling And Pulse-chase Analysis ProtocolsMetabolically Labeled N-linked Oligosaccharides[2-3H] Mannose LabelingDenaturing LysisEnzymatic ReleaseImmunoprecipitated ProteinGeneral Glycoprotein PoolEndo H TreatmentN-glycosidase F TreatmentMolecular FiltrationHPLC Analysis
