Encyclopedia of Experiments: Biology
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo Contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Larva formlarının en büyüğü olan üçüncü bir başlangıç larvasını kültür ortamından seçerek başlayın ve herhangi bir yiyeceği çıkarmak için suyla yıkayın. Larva gözleri veya Bolwig organları larvaların üst ön kısmına bulunduğundan, larvaları hayvanın üzerindeki ışık kaynağına sahip bir agar plakasının ortasına yerleştirin. Oda ışığını kapatın ve larvaların karanlığa alışmasına izin verin.
Larva görünür ışık tarafından yapılan bir ışık noktasında zar zor tespit edildiğinden, kamera için hayvanı aydınlatmak için kızılötesi LED ışıklarını açın. Hayvan yolunu kontrol etmek için doğrudan sürünmeye başlayana kadar bekleyin. Ve sonra plakayı döndürün, böylece larva doğrudan ışık noktasına doğru sürünür. Işıkta sürünen hayvanı kaydedin ve daha sonra ışık noktasından uzaklaşın. Bu ışıktan kaçınma taktiği, larvaların yiyeceğe gömülerek avcılardan kaçınmasına yardımcı olur.
Aşağıdaki örnekte, Drosophila larvalarının farklı genetik suşlarının ışıktan kaçma yeteneğini test etmek için ışık noktası testini gerçekleştireceğiz.
- Larvayı görüntüleme kurulumuna tanıtmadan önce, ışık konumunun kısa bir videosunu alın ve filtresiz kontrol arka plan videosunu "lightarea1" olarak adlandırın. Filtreyi kamera lensine geri yerleştirin ve larvaların açıkça gözlemlenmesine izin verirken deneysel cihazdan mümkün olduğunca düşük bir ayarda bir ışık açın. Bazı larvaları kültür ortamından çıkarmak için bir kaşık kullanın ve üçüncü bir başlangıç larvasını yavaşça seçin.
Larvaları damıtılmış suda yıkayın ve larvaları agar plakasının ortasına yerleştirin. Larvalardan fazla suyu yavaşça çıkarın ve oda ışığını kapatın. Kızılötesi LED ışığını açmadan önce larvaların karanlık ortamda iki dakika alışmasına izin verin. Aşağıdaki ışıktan kaçınma davranış deneyinin karanlıkta yapılması gerekir. Gösterinin rahatlığı için parlak ışıkta çekim yaptık.
Larvayı plakanın ortasına hafifçe fırçalayın. Larva düz bir şekilde sürünmeye başladığında, larvayı ışık noktasına doğru yönlendirmek için plakayı döndürün. Kaydetme yolunu seçmek için Yakalama, Kur ve Video Yakalama'yı tıklatın.
Filtreyi kameradan uzaklaştırın ve ışık noktasının konumunun kısa bir videosunu alın. Ardından gönderiyi filtresiz bir video olarak adlandırın, "lightarea2" ve ışık noktası konumunun değişmemesini sağlamak için bu videoyu "lightarea1" videosuyla karşılaştırın.
