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Flussi di lavoro di etichettatura della proteasi e catalizzata da acidi Impiegando<sup> 18</sup> O arricchita di acqua
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Protease- and Acid-catalyzed Labeling Workflows Employing 18O-enriched Water
DOI:

09:43 min

February 20, 2013

,

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:43PALeO-TimeCourse: Protease-catalyzed Labeling of Proteolytic Cleavages
  • 02:43PALeO-TimeCourse: Postdigestion Labeling of Proteolytic Termini
  • 03:48ALeO-TimeCourse: Acid-catalyzed Labeling of Carboxyl Groups
  • 04:25MALDI-TOF/TOF MS/MS Data Acquisition and Analysis
  • 06:35Preparation of Spectral Time and 18O-incorporation Plots
  • 07:06Representative Results
  • 08:58Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Isotopi stabili flussi di lavoro in materia di etichettatura che impiegano<sup> 18</sup> O-acqua arricchita (Leo-flussi di lavoro) sono strumenti versatili per quantitativi e qualitativi studi di proteomica. In flussi di lavoro proteasi assistite (Paleo),<sup> 18</sup> O-atomi sono introdotti da scissione proteolitica e carbossilici reazioni di scambio dell'ossigeno mediata da proteasi. Nel acido-catalizzata (Aleo) del flusso di lavoro,<sup> 18</sup> O-atomi sono introdotti da scambio di ossigeno carbossile a pH basso.

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