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Der schnellere, Hohe Auflösung, MTPA-GFP-basierte Mitochondriale Fusion Assay Acquiring Kinetische Daten mehrerer Zellen parallel mit Hilfe der konfokalen Mikroskopie
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JoVE Journal Biologia
A Faster, High Resolution, mtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion Assay Acquiring Kinetic Data of Multiple Cells in Parallel Using Confocal Microscopy
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Der schnellere, Hohe Auflösung, MTPA-GFP-basierte Mitochondriale Fusion Assay Acquiring Kinetische Daten mehrerer Zellen parallel mit Hilfe der konfokalen Mikroskopie

DOI:
10.3791/3991-v

•

10:45 min

•

July 20, 2012

•

, , , ,
1Department of Neuroscience, Center for Neuroscience Research,Tufts School of Medicine, 2Department of Internal Medicine, Geriatrics & Gerontology,Wake Forest Baptist Medical Center, 3Department of Medicine,Boston University Medical Center

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:33Imaging Plate Preparation
  • 02:29Imaging Parameters for the Zeiss LSM 710 Confocal Microscope
  • 03:37Optimizing the Imaging Parameters
  • 04:49Mitochondrial-fusion Assay Set-up
  • 07:36Analyzing the PA-GFP Signal Intensity
  • 08:17Results: Representative Mitochondrial-fusion Assays
  • 09:49Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Mitochondrien-Fusion wurde durch das Verfolgen der Äquilibrierung von photokonvertiertem Matrix-bezogenen GFP über die mitochondriale Netzes über die Zeit gemessen. Bisher konnte nur eine Zelle zu einer Stunde lange kinetische Analyse bei einer Zeit unterworfen werden. Wir präsentieren eine Methode, die misst gleichzeitig mehrere Zellen und beschleunigt so den Prozess der Datensammlung.

Tags

FasterHigh ResolutionMtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion AssayKinetic DataMultiple CellsParallelConfocal MicroscopyFusion ActivityPhoto-conversionPhotoactivatable GFP (mtPAGFP)EquilibrationLiving CellsTime Lapse ApproachScale UpAutomateLow Concentration Of TMRESignal IntensityPAGFP Expressing CellsSubcellular QuantificationCytoarchitectural Environment

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