Rivista
/
Biologia
/
CRISPR / Cas9 üzerinden Memeli Hücre Hatlarında Genomik Delesyonlar Üretimi
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Generation of Genomic Deletions in Mammalian Cell Lines via CRISPR/Cas9
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

CRISPR / Cas9 üzerinden Memeli Hücre Hatlarında Genomik Delesyonlar Üretimi

DOI:
10.3791/52118-v

•

09:40 min

•

January 03, 2015

•

, ,
1Harvard Medical School, 2Division of Hematology/Oncology,Boston Children’s Hospital, 3Department of Pediatric Oncology,Dana-Farber Cancer Institute, 4Howard Hughes Medical Institute

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:22Transfecting CRISPRs into MEL Cells
  • 02:35Fluorescence Activated Cell Sorting of Transfected Cells
  • 03:41Primer Validation and Screening Bulk Cultures for CRISPR/Cas9-Mediated Deletion
  • 05:26Screening CRISPR/Cas9 Clones for Deletions and Clone Selection
  • 07:10Results: Deletion of Pim1 in MEL Cells
  • 09:00Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

CRISPR/Cas9 is a robust system to produce disruption of genes and genetic elements. Here we describe a protocol for the efficient creation of genomic deletions in mammalian cell lines using CRISPR/Cas9.

Tags

Genomic DeletionsCRISPR/Cas9Genome EngineeringSingle Guide RNA (sgRNA)Double-strand Breaks (DSBs)Non-homologous End Joining (NHEJ)Loss-of-function StudiesMammalian Cell Lines

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Memeli Hücreleri RNAi Tarama MİSYON esiRNA

Çoklu Gen Delesyonlar Taşıma Maya Suşlarında Nesil için Yeşil Canavar Süreci

Tetrasiklin-indüklenebilir (Tet-on) shRNA veya cDNA Expression Durağan İnsan Hücre Üretimi

Anaerobik büyüme ve bakım memeli hücre hatları

Kıvılcım Susturma: CRISPR/Cas9 Zayıf Elektrikli Balıklarda Genom Düzenleme

CRISPR/Cas9 Kullanarak Birincil İnsan B Hücrelerinin Genom Mühendisliği

TGF-β aracılı Endotelden Mezenkimal Geçişe (EndMT) ve CRISPR/Cas9 Gen Düzenleme Kullanarak EndMT Efektörlerinin Fonksiyonel Değerlendirmesi

Construction of Homozygous Mutants of Migratory Locust Using CRISPR/Cas9 Technology

CRISPR/Cas9 Gen Tedavisi Uygulamaları için Hematopoetik Kök ve Progenitör Hücrelerin Gen Düzenlemesi

CRISPR / Cas9 Oryantal Meyve Sineği Bactrocera dorsalis'in mutagenezi için protokoller

Read Article