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Produção de Domínios salientes Norovirus Humanos em<em> E. coli</em> Para raios-X Cristalografia
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Production of Human Norovirus Protruding Domains in E. coli for X-ray Crystallography

Produção de Domínios salientes Norovirus Humanos em<em> E. coli</em> Para raios-X Cristalografia

DOI:
10.3791/53845-v

•

10:46 min

•

April 19, 2016

•

, , ,
1Schaller Research Group,University of Heidelberg and the German Cancer Research Center, 2Department of Infectious Diseases, Virology,University of Heidelberg

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:47P Domain Expression
  • 02:251st Purification Step and Protease Cleavage
  • 05:142nd Purification Step
  • 06:283rd Purification Step
  • 07:28Crystallization of the P Domain
  • 09:01Results: Evaluation of Protein Elution
  • 09:46Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Aqui, descrevemos um método para expressar e purificar norovirus alta qualidade salientes domínios (P) em E. coli para uso em estudos de cristalografia de raios-X. Este método pode ser aplicado a outros domínios calicivírus P, bem como proteínas não estruturais, isto é., A proteína virai ligada ao genoma (VPg), protease, e polimerase de ARN dependente de ARN (RdRp).

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Keywords: NorovirusProtruding DomainE. ColiX-ray CrystallographyProtein ExpressionProtein PurificationProtein CrystallizationMBP-His-P Domain Fusion ProteinTransformationIPTG InductionCell LysisNickel-NTA Agarose Purification

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