Rivista
/
/
Протокол для множественного нокаута гена в мышиных органоидах малого кишечника Использование CRISPR-конкатэмера
JoVE Journal
Bioingegneria
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioingegneria
A Protocol for Multiple Gene Knockout in Mouse Small Intestinal Organoids Using a CRISPR-concatemer
DOI:

11:53 min

July 12, 2017

, , , , ,

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:50Cloning of gRNAs into the CRISPER-concatemer Vector
  • 03:40Assessing Success of Cloning by Restriction Digest
  • 05:28Preparing Intestinal Organoids for Electroporation
  • 08:08Electroporation
  • 10:36Results: Successful Generation of CRISPER-concatemers and Electroporation of Intestinal Organoids
  • 11:24Conlcusion

Summary

Traduzione automatica

В этом протоколе описаны этапы клонирования нескольких однонаправленных РНК в один направляющий вектор-конкатенатор РНК, который особенно полезен при создании нокаутов с несколькими генами с использованием технологии CRISPR / Cas9. Появление двойных нокаутов в органоидах кишечника показано как возможное применение этого метода.

Video correlati

Read Article