生成大型 gRNA 库的方法应简单、高效且具有成本效益。我们描述了一种基于目标 DNA 酶消化的 gRNA 库的生成协议。这种方法, CORALINA (全面 gRNA 图书馆一代通过控制核酸活动) 提出了一个替代昂贵的定制寡核苷酸合成。