This content is Free Access.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 00:48Digestion of DNA with MNase and Separation of DNA Fragments by PAGE
- 03:05Isolation of DNA Fragments from PAGE Gels and Linker Generation
- 04:26End Repair of Gel-purified Fragments and Linker Ligation
- 05:32Size Selection and Assembly of Vector-insert Construct
- 06:18Electroporation of TG1 Electrocompetent E. coli Cells
- 08:38Results: a gRNA Library can be Generated from and Target DNA
- 09:56Conclusion
Metoder för att skapa storskaliga gärna bibliotek bör vara enkel, effektiv och kostnadseffektiv. Vi beskriver ett protokoll för produktion av gärna bibliotek baserat på enzymatisk nedbrytning av mål-DNA. Denna metod, CORALINA (omfattande gärna biblioteket generationen genom kontrollerad nuclease aktivitet) presenterar ett alternativ till kostsamma anpassade oligonukleotiden syntes.
