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Una procedura di isolamento del RNA basati su Oligonucleotide Tandem recuperare mRNA-proteina eucariotica complessi
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Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
- 02:22Protein Extract Preparation
- 04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
- 05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
- 07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
- 09:00Conclusion
È descritta una procedura di isolamento di RNA (viaggio) tandem per il recupero dei complessi in modo endogeno formato mRNA-proteina. In particolare, complessi RNA-proteina sono reticolate in vivo, poliadenilazione RNAs sono isolati dagli estratti con i branelli di oligo e particolare mRNA vengono catturati con oligonucleotidi antisenso RNA modificati. Proteine legate a mRNA vengono rilevati dall'analisi del immunoblot.
