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Isolamento de células-tronco a partir de culturas esferóides tridimensionais
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Capitoli
- 00:04Titolo
- 01:16Culture and Maintenance of HPrEC Cells in 2D
- 02:30Labeling HPrEC with BrdU, CFSE, or Far Red Pro-dyes
- 03:24Prostasphere Formation in the 3D Basement Membrane Culture System
- 04:27Isolation of the CFSE Label-retaining Prostate Stem Cells by FACS Sorting
- 06:45Results: Evaluation of the Sphere Based Label-retaining Assay
- 08:03Conclusion
Usando células epitelia de próstata primárias humanas, relatamos um novo método livre de biomarcadores de caracterização funcional de células semelhantes a troncos por um ensaio de retenção de rótulos à base de esferóides. Um protocolo passo a passo é descrito para a rotulagem de células BrdU, CFSE ou Far Red 2D; formação tridimensional de esferóides; identificação de células-tronco de retenção de rótulos por imunocitoquímica; e isolamento pela FACS.
