Rivista
/
/
В Vitro Направленная эволюция ограничения Эндонуклеза с более строгой спецификой
JoVE Journal
Genetica
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetica
In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity
DOI:

09:16 min

March 25, 2020

,

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
  • 02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
  • 05:07Continued Processing of Libraries and Selection
  • 07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
  • 08:16Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Ограничение эндонуклеазы с новой специфичностью последовательности может быть разработано из ферментов, распознающих частично вырожденную последовательность. Здесь мы предоставляем подробный протокол, который мы успешно использовали, чтобы изменить специфику последовательности фермента NlaIV. Ключевыми составляющими протокола являются разобщенности транскрипции/перевода и выбор вариантов с новой последовательностью.

Video correlati

Read Article