In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity

00:05Introduction
00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
05:07Continued Processing of Libraries and Selection
07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
08:16Conclusion

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새로운 서열 특이성을 가진 제한 endonucleases는 부분적으로 퇴화한 서열을 인식하는 효소로부터 개발될 수 있다. 여기에서 우리는 우리가 성공적으로 NlaIV 효소의 순서 특이성을 바꾸기 위하여 이용된 상세한 프로토콜을 제공합니다. 프로토콜의 주요 성분은 전사/번역 반응의 생체외 구획화 및 새로운 서열 특이성을 가진 변이체의 선택이다.

더 엄격한 특이성을 가진 제한 endonuclease의 시험관 진화

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