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Purificación de tubulina con modificaciones posttranslacionales controladas e isotipos de fuentes limitadas por ciclos de polimerización-despolimerización
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Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Este protocolo describe la purificación de la tubulina a partir de fuentes pequeñas/medianas como células cultivadas o cerebros de ratón único, utilizando ciclos de polimerización y despolimerización. La tubulina purificada se enriquece en isotipos específicos o tiene modificaciones posttranslacionales específicas y se puede utilizar en ensayos de reconstitución in vitro para estudiar dinámicas e interacciones de microtúbulos.
