/
/
Zuivering van tubuline met gecontroleerde posttranslationele modificaties en isotypes uit beperkte bronnen door polymerisatie-depolymerisatiecycli
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Dit protocol beschrijft tubulinezuivering uit kleine/middelgrote bronnen zoals gekweekte cellen of enkele muizenhersenen, met behulp van polymerisatie- en depolymerisatiecycli. De gezuiverde tubuline is verrijkt in specifieke isotypes of heeft specifieke posttranslationele modificaties en kan worden gebruikt in in vitro reconstitutietesten om microtubulidynamiek en interacties te bestuderen.
