È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
- 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
- 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
- 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
- 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
- 07:40Conclusion
Co-translationele insertie in voorgevormde nanodiscs maakt het mogelijk om celvrije gesynthetiseerde membraaneiwitten te bestuderen in gedefinieerde lipideomgevingen zonder contact met detergentia. Dit protocol beschrijft de voorbereiding van essentiële systeemcomponenten en de kritieke parameters voor het verbeteren van de expressie-efficiëntie en monsterkwaliteit.
