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Études des interactions chaperonne-cochapéroé à l’aide d’un essai homogène à base de billes
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Capitoli
- 00:04Introduction
- 01:28Coupling of Hsp90 C-Terminal Peptide to the Acceptor Beads
- 02:49Assay for Interaction Between GST-FKBP51 or GST-FKBP52 and Hsp90 C-Terminal Peptide and Inhibition with Small Molecular Mass Compounds
- 04:14Dose-Response Curve Generation and IC50 Calculation
- 04:58Results: Inhibitory Effect of Small Molecular Weight Test Compound D10
- 05:59Conclusion
Ce protocole présente une technique pour sonder les interactions protéine-protéine à l’aide de perles de donneur liées au glutathion avec des co-chaperons à motif TPR fusionnés GST et des perles accepteurs couplées à un peptide dérivé de Hsp90. Nous avons utilisé cette technique pour dépister de petites molécules afin de perturber les interactions Hsp90-FKBP51 ou Hsp90-FKBP52 et identifié des inhibiteurs puissants et sélectifs de l’interaction Hsp90-FKBP51.
