يصف هذا البروتوكول التوصيف الميكانيكي ثنائي المحور، وتحديد كمية الكولاجين القائمة على التصوير في مجال التردد المكاني المستقطب، والتشريح المجهري لمنشورات الصمام ثلاثي الشرف. توضح الطريقة المقدمة كيف تساهم طبقات النشرة في سلوكيات النشرة الشاملة.