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Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
- 02:00EdU Labeling
- 02:40Cell Fixation and Permeabilization
- 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
- 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
- 07:56Conclusion
Nous décrivons deux protocoles complémentaires pour déterminer avec précision la durée de la phase S chez S. cerevisiae à l’aide d’EdU, un analogue de la thymidine, qui est incorporé in vivo et détecté à l’aide de la chimie Click par microscopie et cytométrie en flux. Il permet de caractériser facilement la durée de la réplication de l’ADN et les défauts de réplication négligés chez les mutants.
