Extraktion modifizierter Mikrotubuli aus Säugetierzellen zur Untersuchung von Mikrotubuli-Protein-Komplexen mittels Kryo-Elektronenmikroskopie

In dieser Arbeit beschreiben wir ein Protokoll zur Extraktion von endogenem Tubulin aus Säugetierzellen, denen spezifische Mikrotubuli-modifizierende Enzyme fehlen oder diese enthalten können, um Mikrotubuli zu erhalten, die für eine bestimmte Modifikation angereichert sind. Anschließend beschreiben wir, wie die extrahierten Mikrotubuli mit gereinigten Mikrotubuli-bindenden Proteinen dekoriert werden können, um Gitter für die Kryo-Elektronenmikroskopie herzustellen.