Summary

Les cellules souches embryonnaires des cellules dérivées endothéliales pour traitement de l'ischémie des membres postérieurs

Published: January 23, 2009
doi:

Summary

La procédure chirurgicale pour la livraison de cellules souches embryonnaires dérivées des cellules endothéliales de la patte postérieure ischémique est démontrée, avec des non-invasive de suivi par imagerie par bioluminescence.

Abstract

Artérielle périphérique maladie (PAD) les résultats de rétrécissement des artères périphériques qui fournissent le sang oxygéné et de nutriments pour les jambes et les pieds, cette pathologie entraîne des symptômes tels que la claudication intermittente (douleur à la marche), des ulcérations douloureuses ischémiques, ou même menaçant le membre gangrène. On croit généralement que l'endothélium vasculaire, une monocouche de cellules endothéliales qui investit la surface luminale de tous les vaisseaux sanguins et lymphatiques, joue un rôle dominant dans l'homéostasie vasculaire et la régénération vasculaire. En conséquence, base de cellules souches de régénération de l'endothélium peut être une approche prometteuse pour le traitement de la MAP.

Dans cette vidéo, nous démontrons la transplantation de cellules souches embryonnaires (CSE) dérivées des cellules endothéliales pour le traitement de l'ischémie unilatérale hindimb comme un modèle de la PAD, suivi par des non-invasive de la cellule de suivi homing et de la survie par imagerie par bioluminescence. Les matériaux et les procédures spécifiques pour la livraison et l'imagerie cellulaire seront décrites. Ce protocole suit une autre publication dans la description de l'induction d'une ischémie des membres postérieurs par Niiyama et al. 1

Protocol

1. La différenciation des CSE de souris en cellules endothéliales Le protocole de différenciation en cellules endothéliales CES est décrite ailleurs et n'est pas l'objet de ce protocole 2,3. Brièvement, les cellules sont autorisés à se différencier, et les cellules qui sont positifs pour les marqueurs endothéliaux tels que CD31 ou vasculaire cadhérine endothéliale (VE-cadhérine) sont ensuite purifiées par tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). <p class="jove…

Discussion

CES sont une source de cellules prometteuses pour le traitement de l'ischémie tissulaire en raison de leur plasticité de différenciation et de leur capacité à donner naissance à des lignées de cellules comprenant les trois feuillets embryonnaires, dont les cellules endothéliales. Pour surmonter les problèmes éthiques associés avec les CES, cellules souches pluripotentes induites (CISP) peut être une source de cellules souches pluripotentes alternatives qui surmonte les préoccupations éthiques. Outre les CES, les cellules s…

Acknowledgements

Les auteurs remercient Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, et le Stanford petit noyau d'imagerie animale pour l'assistance technique. Les auteurs remercient également AM Bickford, Inc pour le soutien des équipements vétérinaires. Cette recherche a été financée par des subventions de recherche du National Institutes of Health (R01 HL-75 774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), le tabac en Californie Programme connexes Disease Research de l'Université de Californie (15IT-0257 et 1514RT-0169) , et le California Institute for Regenerative Medicine (RS1-00183).

NH est soutenu par une bourse de l'American Heart Association. peut Heart Association.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Surgical tools Tool Fine Science Tools    
Syringe needle Tool BD   28G insulin syringe is preferred
Phosphate Buffered Saline Reagent Invitrogen    
D-luciferin Reagent Biosynth International, Inc   Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS
IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software Equipment Xenogen Corporation    

References

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Cite This Article
Huang, N. F., Niiyama, H., De, A., Gambhir, S. S., Cooke, J. P. Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia. J. Vis. Exp. (23), e1034, doi:10.3791/1034 (2009).

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