Hindlimb Ischemia के उपचार के लिए भ्रूण स्टेम सेल व्युत्पन्न endothelial कोशिकाओं
Summary
के वितरण के लिए शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया भ्रूण स्टेम सेल व्युत्पन्न इस्कीमिक hindlimb endothelial कोशिकाओं, bioluminescence इमेजिंग द्वारा गैर इनवेसिव ट्रैकिंग के साथ प्रदर्शन किया है.
Abstract
परिधीय परिधीय धमनियों का संकुचन है कि पैर और पैरों के लिए oxygenated रक्त और पोषक तत्वों की आपूर्ति से धमनी रोग (पैड) के परिणाम, इस विकृति आंतरायिक खंजता (दर्द चलने के साथ), दर्दनाक इस्कीमिक ulcerations, या भी अंग की धमकी कोथ जैसे लक्षण का कारण बनता है. आमतौर पर यह माना है कि संवहनी endothelium, endothelial कोशिकाओं की एक monolayer है कि सभी रक्त और लसीका वाहिकाओं के luminal सतह निवेश, संवहनी homeostasis और संवहनी उत्थान में एक प्रमुख भूमिका निभाता है है. एक परिणाम के रूप में, स्टेम सेल आधारित endothelium के उत्थान पैड के इलाज के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण हो सकता है.
इस वीडियो में, हम भ्रूण स्टेम सेल का प्रत्यारोपण (ईएससी) का प्रदर्शन व्युत्पन्न पैड की एक मॉडल के रूप में एकतरफा hindimb ischemia के इलाज के लिए endothelial कोशिकाओं, bioluminescence इमेजिंग द्वारा घर वापस आना और सेल अस्तित्व के गैर इनवेसिव ट्रैकिंग द्वारा पीछा किया. सेल वितरण और इमेजिंग के लिए विशिष्ट सामग्री और प्रक्रियाओं का वर्णन किया जाएगा. इस प्रोटोकॉल Niiyama एट अल द्वारा hindlimb ischemia के प्रेरण का वर्णन करने में एक अन्य प्रकाशन के बाद 1 .
Protocol
Discussion
ESCs भेदभाव और उनके सेल सभी तीन रोगाणु परतें, endothelial कोशिकाओं सहित शामिल प्रजातियों को जन्म देने की क्षमता उनके plasticity की वजह से से ऊतक ischemia के इलाज के लिए एक आशाजनक सेल स्रोत हैं. ESCs के साथ जुड़े नैतिक चिंताओं पर काबू पान?…
Acknowledgements
लेखक Andrea Axtell, सातोशी Itoh, एमडी, जेफ Velotta, एमडी, अनुदान होयत, रॉबर्ट सी. रॉबिंस, एमडी, जिन यू, एमडी, टिम डोयल, पीएचडी, और स्टैनफोर्ड तकनीकी सहायता के लिए छोटे पशु इमेजिंग कोर धन्यवाद. लेखकों को भी AM Bickford इंक पशु चिकित्सा उपकरणों के समर्थन के लिए धन्यवाद. इस शोध स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों से अनुसंधान अनुदान (HL-75,774 R01, R01 CA098303, HL085743 R21, HL087746 1K12), कैलिफोर्निया तंबाकू कैलिफोर्निया विश्वविद्यालय (15IT 0257 और 1514RT-0169) से संबंधित रोग अनुसंधान कार्यक्रम के द्वारा समर्थित किया गया , और पुनर्योजी चिकित्सा के लिए कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट (RS1 ००,१८३).
राष्ट्रीय राजमार्ग अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित है. हार्ट एसोसिएशन कर सकते हैं.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Surgical tools | Tool | Fine Science Tools | ||
| Syringe needle | Tool | BD | 28G insulin syringe is preferred | |
| Phosphate Buffered Saline | Reagent | Invitrogen | ||
| D-luciferin | Reagent | Biosynth International, Inc | Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS | |
| IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software | Equipment | Xenogen Corporation |
References
- Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. Murine model of hindlimb ischemia. JoVE. , (2008).
- Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. Endothelial cells derived from human embryonic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).
- Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. Nature. 408, 926-926 (2000).
- De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging. Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).
- Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization. J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).
- Cook, M. J. The anatomy of the laboratory mouse. , (1976).
- Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nature Med. 4, 245-247 (1998).
- Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects. Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).
- Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering. Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).
- Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery. Circulation. 113, 1005-1114 (2006).
- Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
