Cellule embrionali staminali endoteliali derivati dalle cellule per il trattamento di ischemia degli arti posteriori
Summary
La procedura chirurgica per la consegna delle cellule staminali embrionali derivate le cellule endoteliali alle arti posteriori ischemico è dimostrato, con il monitoraggio non invasivo per l'imaging bioluminescenza.
Abstract
Malattia arteriosa periferica (PAD) è il risultato restringimento delle arterie periferiche che forniscono sangue ossigenato e sostanze nutritive alle gambe e ai piedi, questa patologia provoca sintomi come la claudicatio intermittente (dolore con piedi), dolorose ulcerazioni ischemiche o addirittura pericolose per la gangrena degli arti. Si ritiene generalmente che l'endotelio vascolare, un monostrato di cellule endoteliali che investe la superficie luminale di tutti i vasi sanguigni e linfatici, gioca un ruolo dominante nell'omeostasi vascolare e la rigenerazione vascolare. Di conseguenza, a base di cellule staminali rigenerazione dell'endotelio può essere un approccio promettente per il trattamento PAD.
In questo video, dimostriamo il trapianto di cellule staminali embrionali (ESC)-derivate cellule endoteliali per il trattamento di ischemia unilaterale hindimb come modello di PAD, seguita da monitoraggio non invasivo di homing delle cellule e della sopravvivenza attraverso l'immagine bioluminescenza. I materiali e procedure specifiche per la consegna delle cellule e di imaging verranno descritte. Questo protocollo segue un'altra pubblicazione che descrive l'induzione di ischemia degli arti posteriori da Niiyama et al 1.
Protocol
Discussion
CES sono una fonte di cellule promettente per il trattamento di ischemia del tessuto a causa della loro plasticità di differenziazione e la loro capacità di dare origine a linee cellulari che comprende tutti e tre i foglietti embrionali, comprese le cellule endoteliali. Per superare le questioni etiche associate con i CES, cellule staminali pluripotenti indotte (iPSCs) può essere un'alternativa fonte di staminali pluripotenti cella che supera i problemi etici. Oltre a CES, le cellule staminali adulte, come le cellule progenitrici end…
Acknowledgements
Gli autori ringraziano Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, e lo Small Animal Imaging Stanford Nucleo per l'assistenza tecnica. Gli autori hanno anche ringraziare AM Bickford, Inc. per il supporto di attrezzature veterinarie. Questa ricerca è stata sostenuta da borse di ricerca dal National Institutes of Health (R01 HL-75774, CA098303 R01, R21 HL085743, 1K12 HL087746), il tabacco California sul programma di ricerca sulle malattie della University of California (15IT-0257 e 1514RT-0169) , e l'Istituto di Medicina Rigenerativa della California (RS1-00183).
NH è sostenuto da una borsa di studio della American Heart Association. può Heart Association.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Surgical tools | Tool | Fine Science Tools | ||
| Syringe needle | Tool | BD | 28G insulin syringe is preferred | |
| Phosphate Buffered Saline | Reagent | Invitrogen | ||
| D-luciferin | Reagent | Biosynth International, Inc | Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS | |
| IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software | Equipment | Xenogen Corporation |
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