Yetişkin Drosophila melanogaster Locomotion Yüksek Çözünürlüklü Video Takip
Summary
Karmaşık lokomotor davranış çalışma<em> Drosophila melanogaster</em> Yeteneği belirli bir sineğin hareket değişiklikleri ölçmek için bağımlı. Bu makale, yüksek çözünürlüklü bir izleme sistemi ile bunun nasıl yapılacağını gösteriyor.
Abstract
Sinekler, bu alandaki araştırmacılar genetik araçları bolluğu nedeniyle karmaşık davranışlar eğitim için önemli bir model sağlar. Lokomotor davranışlarının incelenmesi<em> Drosophila melanogaster</em> Hareket sırasında ya da belirli bir görev için yanıt değişiklikleri ölçmek için mümkün yeteneğine dayanıyor. Bu nedenle, biz bu yazıda tarif eden biri olarak bir yüksek çözünürlüklü video izleme sistemi, gerçek zamanlı olarak lokomosyon ölçmek için değerli bir araçtır. Protokol, kare bir odasında 1 / 32 filme dönemi takip eden sinekler momentum, kırmak için bir başlangıç hava darbe kullanımını gerektirir. Bir izleme programı daha sonra 10 milisaniye aralıklarla odanın içinde her sineğin anlık hızını hesaplamak için kullanılır. Analiz yazılımı daha sonra bu verileri derler ve anesthetization veya immobilizasyon olmaksızın sinekler işleme Bu protokol, davranışsal görevler için uygun beslenme ve sinek yönetimi ele alacak, ortalama hız, maksimum hız, hareket için harcanan zaman, ivme, vb gibi çeşitli parametrelerin çıkışları kontrollü bir ortamda oluşturulması, ve tahlil çalışan baştan sona.
Protocol
Discussion
Kurulumda, orta derecede güçlü bir hava nabız geçici fly hareketini durdurur. Hava darbe sona erdiğinde, sinekler, Şekil 2'de gösterildiği gibi, bu durağan durum ve normal locomote serbest bırakılır. Bu hava darbe etkili nüfusun lokomosyon senkronize Çünkü, biz, biz de bir ivme kıran uyaranı takiben hareket başlangıcında çalışma böylece deneme başlamak için de kullanabilirsiniz. Başlanmasının ardından, lokomotor parametreleri hava darbesi (Şekil 2) etkilenmez beri tahlil, ancak, bir …
Acknowledgements
Bu çalışma, Sağlık Hibe R01 GM54408 LC Griffith verilen Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından da desteklenmiştir. Fred Wolf Biz bizim kare odasının tasarımı ve tayini, Frank Mello, Odamızın, bina ve analiz konularla ilgili yararlı konuşmalar için Dan Valente ve Tim Lebestky Brandeis Üniversitesi makine atölyesi kurma tüm yardımlarından dolayı teşekkür etmek istiyorum.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
