Suivi vidéo haute résolution de la locomotion chez les adultes Drosophila melanogaster
Summary
L'étude du comportement locomoteur complexes<em> Drosophila melanogaster</em> Dépend de la capacité à quantifier les changements dans les mouvements d'une mouche donné. Cet article montre comment faire cela en utilisant un système de suivi à haute résolution.
Abstract
Les mouches de fournir un modèle important pour étudier le comportement complexe en raison de la pléthore d'outils génétiques disponibles pour les chercheurs dans ce domaine. Etudier le comportement locomoteur de<em> Drosophila melanogaster</em> Repose sur la capacité d'être en mesure de quantifier les changements de mouvement au cours ou en réponse à une tâche donnée. Pour cette raison, un système de vidéo haute résolution de suivi, telles que celle que nous décrivons dans ce papier, est un outil précieux pour mesurer la locomotion en temps réel. Notre protocole implique l'utilisation d'une impulsion initiale de l'air à briser l'élan des mouches, suivie d'une période de tournage trente-deuxième dans une chambre carrée. Un programme de suivi est ensuite utilisée pour calculer la vitesse instantanée de chaque volée dans la chambre par incréments de 10 ms. Logiciel d'analyse compile ensuite ces données, et les sorties de divers paramètres comme la vitesse moyenne, vitesse max, le temps passé en mouvement, accélération, etc Ce protocole traitera bonne alimentation et la gestion des mouches pour des tâches comportementales, la manipulation des mouches, sans anesthésie ou l'immobilisation , la mise en place d'un environnement contrôlé, et en exécutant le test de bout en bout.
Protocol
Discussion
Dans notre configuration, une impulsion d'air assez fort mouvement s'arrête transitoirement voler. Lorsque l'impulsion de l'air se termine, les mouches sont libérés de cet état stationnaire et locomote normalement, comme le montre la figure 2. Parce que cette impulsion d'air synchronise de manière efficace la locomotion de la population, nous l'utilisons pour commencer le procès, de sorte que nous pouvons également étudier le début du mouvement suite à un stimulus élan révolutionnaire…
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par les Instituts nationaux de la santé de subvention R01 GM54408 attribué à LC Griffith. Nous tenons à remercier Fred Wolf pour son aide dans la conception de notre chambre carrée et la mise en place de notre test, Frank Mello à la boutique de Brandeis University machines pour la construction de notre chambre, et Dan Valente et Tim Lebestky pour des conversations utiles concernant les questions d'analyse.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
