골수에 조혈 세포의 유도
Summary
이 문서는 골수에서 틈새에 조혈 세포의 추적을 연구하는 데 사용하는 프로토콜을 설명합니다.
Abstract
호밍는 이식 조혈 세포와 합치다 여행이나 골수에 거주를 설정하실 수 있습니다 약자 현상입니다. 다양한 chemomkines과 수용체는 조혈 줄기 세포의 유도에 관여하고 있습니다. [1, 2]
본 논문은 조혈 줄기 세포 연구에 사용되는 고전적인 추적 프로토콜을 설명합니다. 일반적으로 이것은 누구의 추적 조사 요구되는 세포 인구를 분리 관심 염색이 인구가 얼룩과받는 동물의 혈류에 이들 세포를 주입이 포함됩니다. 받는 동물은 다음 주입 및 비율이나 관심의 염색에 대한 양성 세포의 절대적인 번호에 대한 평가 골수 후 미리 정해진 시간에 희생됩니다. 가장 일반적인 실험 계획, 두 유전자 별개의 동물로부터 조혈 세포 (야생 동물 유형 및 해당 노크 아웃)의 위치 추적 효율 중 하나에 비교됩니다. 이 문서는 실험과 같은 내용의 프레임 워크에있는 조혈 세포 유도 프로토콜을 설명합니다.
Protocol
Discussion
호밍는 과정입니다 의하여 줄기 세포, 전구 세포와 차별화된 세포, 혈액 스트림 또는 마우스의 골수 캐비티에 주입 후 골수에 그들의 방법을 포함하여 골수 세포. 정의에서 분명로서, 과학자가 조혈 줄기 세포, 전구 세포 또는 immunophenotyping으로 식별 및 세포 분류에 의해 격리 차별화된 세포의 위치 추적을 공부하기로 수도 있습니다. 일반적으로 과학자들은 혈통 마커에 대한 고갈 골수 세포를 주?…
Acknowledgements
이 프로토콜은 테스트 데이빗 스캐든의 연구실에 최적화되었습니다. 기금은 다나 파버 암 연구소 / 매사 추세츠 종합 병원 임상 혈액 및 종양학 원정대 프로그램에 의해 제공됩니다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Mediatech, Inc | 21-031-CV | ||
| Sterile Fetal Bovine Serum | Valley Biomedical, Inc | BS3033 | ||
| 0.5M EDTA (pH 8.0) | Boston BioProducts | BM-150 | ||
| Tryphan Blue solution | Mediatech, Inc | 25-900-CI | ||
| ACK Lysing Buffer | Lonza | 10-548E | ||
| Isopropranolol U.S.P. | Denison Pharmaceuticals, Inc | |||
| Vybrant DiD cell-labelling solution | Invitrogen | V22887 | ||
| Vybrant DiI cell-labelling solution | Invitrogen | V22885 |
References
- Adams, G. B., et al. Stem cell engraftment at the endosteal niche is specified by the calcium-sensing receptor. Nature. 439 (7076), 599-603 (2006).
- Broxmeyer, H. E. Chemokines in hematopoiesis. Curr Opin Hematol. 15 (1), 49-58 (2008).
