चिकी तंत्रिका ट्यूब उपयोग में न्यूरॉन्स की आनुवंशिक निर्धारित समूह की axonal रास्ते के गूढ़ रहस्य ओवो में Electroporation
Summary
इस वीडियो को दर्शाता है कैसे भ्रूण लड़की रीढ़ की हड्डी उपयोग की हड्डी में न्यूरॉन्स की आनुवंशिक रूप से परिभाषित समूहों के axonal रास्ते कल्पना करने के लिए<em> ओवो में</emविशिष्ट बढ़ाने तत्वों के नियंत्रण के तहत रिपोर्टर जीन> electroporation.
Abstract
रोजगार बढ़ाने तत्वों के न्यूरॉन्स में रिपोर्टर जीन की अभिव्यक्ति ड्राइव axonal प्रक्षेपण पर नज़र रखने के लिए एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया प्रतिमान है. रीढ़ में रीढ़ की हड्डी interneurons की axonal प्रक्षेपण पर नज़र रखने के लिए, रोगाणु लाइन लक्षित रिपोर्टर जीन द्विपक्षीय सममित लेबलिंग उपज. इसलिए, यह ipsi और विपरीत laterally पेश axons के बीच भेद करना मुश्किल है. लड़की न्यूरल ट्यूब में एकतरफा electroporation एक उपयोगी साधन प्रदान करता है केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के एक तरफ करने के लिए एक पत्रकार के जीन की अभिव्यक्ति को सीमित करते हैं, और दोनों पक्षों पर axonal प्रक्षेपण का पालन<sup> ,2 5 – 1</sup>. यह वीडियो पहले दर्शाता है कि कैसे संभाल करने के लिए इंजेक्शन के लिए पहले अंडे. एचएच 18-20 चरण में, डीएनए न्यूरल ट्यूब के त्रिक स्तर में इंजेक्ट किया है, तब टंगस्टन इलेक्ट्रोड समानांतर भ्रूण के लिए रखा जाता है और कम बिजली दालों एक पल्स जनरेटर के साथ प्रशासित रहे हैं. अंडे टेप के साथ बंद है और आगे विकास के लिए एक मशीन में वापस रखा. तीन दिन बाद (E6) रीढ़ की हड्डी भ्रूण से एक खुली किताब की तैयारी के रूप में निकाल दिया जाता है, तय है, और पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला के लिए कार्रवाई की. दाग रीढ़ की हड्डी स्लाइड पर मुहिम शुरू की है और confocal माइक्रोस्कोपी का उपयोग करते हुए कल्पना.
Protocol
Discussion
लड़की भ्रूण में डीएनए प्लाज्मिड के electroporation vivo में अस्थानिक अभिव्यक्ति में एक शक्तिशाली तकनीक के रूप में विकसित. विशिष्ट enhancers, और लड़की electroporation के संयोजन 1,3,5 न्यूरॉन्स की आनुवंशिक रूप से परिभाषित समूह के …
Acknowledgements
इस काम में इसराइल विज्ञान फाउंडेशन, इसराइल के स्वास्थ्य मंत्रालय, और DFG (जर्मन रिसर्च फाउंडेशन) से एके अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.
References
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