השרשה של Ferumoxides תווית אדם בתאי גזע mesenchymal ב פגמים סחוס
Summary
המטרה של המצגת היא להדגים שיטה לשחזור מאוד ליצור מטריצה תא הקשורים שתלים גזע פגמים הסחוס, אשר יכול להיות דמיינו עם MR הדמיה. בתאי גזע מסומנים עם ה-FDA Ferumoxides, מעורבב עם agarose, מושתלים לתוך פגמים סחוס צילמו עם סורק 7T MR.
Abstract
תחום הנדסת הרקמות משלבת את עקרונות הביולוגיה, ההנדסה והרפואה תא לקראת התחדשות של תאים ספציפיים רקמות תפקודית. מטריקס תאים הקשורים גזע שתלים (מאסי) במטרה לחדש פגמים הסחוס עקב פציעות משותף דלקת פרקים או טראומטי. למבוגרים בתאי גזע mesenchymal (MSCs) יש את היכולת להתמיין לתאי השושלת chondrogenic ו הראו תוצאות מבטיחות עבור התא מבוססי טכנולוגיות הסחוס במפרק לתקן. עצמיים MSCs יכול להיות מבודד במגוון של רקמות, ניתן להרחיב בתרביות תאים מבלי לאבד פוטנציאל הבידול שלהם, הדגימו בידול chondrogenic במבחנה 1 vivo, 2.
כדי לספק שמירה מקומיים הכדאיות של MSCs המושתלים פגמים סחוס, פיגום יש צורך, התומך גם בידול התפשטות עתידיים. הארכיטקטורה של היווצרות רקמה פיגום מדריכים מאפשר תאי מטריקס, המיוצר על ידי בתאי גזע, להרחיב. תחקירים קודמים הראו כי 2% agarose פיגום עשוי לתמוך בפיתוח של הסחוס hyaline יציב ואינו לגרום התגובה החיסונית 3.
שימור ארוך טווח של בתאי גזע מושתלים מאסי הוא קריטי עבור התחדשות הסחוס. תיוג של MSCs תחמוצת ברזל עם חלקיקים מאפשר לטווח ארוך מעקב vivo עם פולשנית טכניקות הדמיה MR 4.
מצגת זו תדגים טכניקות MSCs תיוג עם חלקיקי תחמוצת ברזל, הדור של תאים agarose בונה ההשתלה של מבנים אלה לתוך פגמים הסחוס. בונה שכותרתה ניתן לעקוב הלא פולשני עם MR-Imaging.
Protocol
Discussion
פרוטוקול תיאר מספק דרך לשחזור לתייג MSCs חלקיקי תחמוצת ברזל עם השתל ואת אלה MSCs שכותרתו לתוך פגמים הסחוס. טכניקה זו מאפשרת לא פולשנית תיאור של השתלת תא גזע פגמים סחוס עם MR הדמיה, המאפשרת גילוי מוקדם של כשל מאסי. נקע או בזרימת של תאים שכותרתו ניתן לאבחן מבוסס על היעלמותה ש?…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענק מטעם המכון הלאומי של דלקת מפרקים ומחלות עור השלד והשרירים, NIH RO1AR054458.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| PBS (Ca++, Mg++ free) | GIBCO | 14190-144 | ||
| Trypsin-EDTA 0.05% | Invitrogen | 25399-120 | ||
| FBS | Hyclone | SH30071.03 | ||
| Penicillin/Streptomycin | GIBCO | 15140-122 | ||
| Ferumoxides (Endorem) | Guerbet | |||
| Agarose Typ VII | Sigma | A9045 | Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4% |
References
- Mauck, R. L., Yuan, X., Tuan, R. S. Chondrogenic differentiation and functional maturation of bovine mesenchymal stem cells in long-term agarose culture. Osteoarthritis Cartilage. 14, 179-189 (2006).
- Pittenger, M. F. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science. 284, 143-147 (1999).
- Rahfoth, B. Transplantation of allograft chondrocytes embedded in agarose gel into cartilage defects of rabbits. Osteoarthritis Cartilage. 6, 50-65 (1998).
- Henning, T. D., Boddington, S., Daldrup-Link, H. E. Labeling hESCs and hMSCs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with MR imaging. J Vis Exp. , (2008).
