Sincronizzazione nematode: un metodo per ottenere popolazioni di vermi in fasi di sviluppo identiche

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Sarasija, S. e Norman, K. R. Misurazione dei tassi di consumo di ossigeno in Caenorhabditis elegans intattiJ. Vis. Exp. (2019).

In questo video, mostriamo un metodo per produrre una popolazione sincronizzata per lo sviluppo di C. elegansadulti sterili . Il protocollo di esempio sincronizza i worm per studiare i tassi di consumo di ossigeno negli animali vivi.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Sarasija e Norman, Misurazione dei tassi di consumo di ossigeno in Intact Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Crescita e sincronizzazione della popolazione di nematodi Questi animali raggiungeranno lo stadio larvale L4 dopo ~ 42 h. In questo momento, spostare le larve L4 usando un piccone di platino su piastre NGM sementi OP50 contenenti 0,5 mg/mL 5-fluoro-2′-deossiuridina (FUdR) per …

Representative Results

Tabella 1: Ricette per piatti NGM, tampone M9 e soluzione di candeggina. M9 buffer (1 L) DH2O 1.000 mL NaCl 5 g KH2PO4 3 g Na2HPO4 <…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

100 mm; 60 mm Petri dishes Kord-Valmark Labware Products 2900; 2901
15 mL conical tubes Corning 430791
50 mL conical tubes Corning 430829
Agar Fisher Scientific BP1423-2
Bacto peptone BD; Bacto 211677
Bacto tryptone BD; Bacto 211705
Bacto yeast extract BD; Bacto 212705
Bleach Generic
Calcium chloride dihydrate (CaCl2·2H2O) Fisher Scientific C79-500
Cholesterol Fisher Scientific C314-500
Deionized water (dH2O)
Glass Pasteur pipettes Krackeler Scientific 6-72050-900
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4·7H2O) Fisher Scientific BP213-1
Potassium phosphate dibasic (K2HPO4) Fisher Scientific BP363-1
Potassium phosphate monobasic (KH2PO4) Fisher Scientific P285-500
Sodium chloride Fisher Scientific BP358-10
Sodium hydroxide (NaOH) Fisher Scientific BP359-500
Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4) Fisher Scientific BP332-1

Play Video

Cite This Article
Nematode Synchronization: A Method to Obtain Populations of Worms in Identical Stages of Development. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20045, doi: (2023).

View Video