Summary
Здесь мы представляем протокол эффективной и быстрой электроакупунктуры (ЭА) на мышах или молодых крысах с использованием трехмерного (3D) напечатанного держателя. Этот метод позволяет одновременно работать на нескольких животных, экономя время и повышая эффективность эксперимента.
Abstract
Электроакупунктура (ЭА) широко используется для лечения различных заболеваний. Однако основной механизм лечения ЭА остается неясным, что препятствует его продвижению. Механистическое исследование требует использования мышей или крыс для решения этой проблемы. Однако эти животные не послушны экспериментальному процессу, который отнимает много времени. Чтобы решить эти проблемы, мы разработали напечатанный на 3D-принтере фиксатор объема тела мелких животных, чтобы повысить эффективность экспериментов EA на животных. В этом видео подробно показано, как использовать фиксатор для выполнения объемного ЭА на мышах или молодых крысах. Для выбора акупунктурных точек была выбрана передняя косая линия вершины височной (голова MS6) и точка Тяньшу (живот ST25) для проверки эффекта фиксирующего устройства при положении лежа на животе и положении лежа на спине. Использование напечатанного на 3D-принтере держателя для мелких животных позволяет обездвиживать и обрабатывать несколько грызунов одновременно, сокращая время и ресурсы, необходимые для эксперимента. Эта техника может быть применена к другим моделям животных путем 3D-печати различных размеров и потенциально может быть использована для различных условий фиксации. Прибор полезен для продвижения экспериментальных научных исследований в ЭА.
Introduction
Электроакупунктурная терапия (ЭА) – это уникальный метод, при котором акупунктурные иглы вводятся в кожу головы и подключаются к электроаппарату для стимуляции определенных точек1. В отличие от мануальной стимуляции, ЭА позволяет лучше контролировать стимуляцию, стабилизируя определенные частоты и формы волны для достижения оптимального терапевтического эффекта2. Согласно опросу, 81,2% медицинских учреждений в Китае используют ЭА или мануальную акупунктуру для лечения ДЦП, невралгии, паралича лицевого нерва и других состояний. Несмотря на свою популярность, специфический механизм эффективности ЭА до сих пор неизвестен, что препятствует ее продвижению и применению в восстановительном лечении неврологических заболеваний 1,2,3. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы полностью понять механизм эффективности ЭА и способствовать ее использованию в реабилитационном лечении неврологических заболеваний.
По мере того, как влияние иглоукалывания расширяется во всем мире, во многих исследованиях уже изучались механизмы ЭА, выполняемые на моделях грызунов, таких как крысы или мышь 1,2,3. В экспериментах EA на грызунах часто встречаются некоторые проблемы. Во-первых, как обездвижить грызунов без анестезии, так как иглоукалывание, проводимое на бодрствующих субъектах, больше отражает клиническую практику. Кроме того, некоторые эксперименты требуют, чтобы животные бодрствовали, чтобы наблюдать эффекты лечения 2,3. Еще одной проблемой является точное определение акупунктурных точек у мышей или крыс, которые соответствуют акупунктурным точкам у людей. Точная локализация акупунктурных точек у подопытных грызунов в настоящее время изучается многими учеными 4,5. В этом протоколе были выбраны MS6 и ST25, которые были четко определены у грызунов трансформацией анатомической локализации человека. MS6 обычно используется для лечения некоторых заболеваний головного мозга, таких как болезнь Паркинсона6. ST25 обычно используется для лечения желудочно-кишечных проблем, таких как диарея7. Эти две акупунктурные точки были выбраны в первую очередь для того, чтобы продемонстрировать, как грызуны могут быть эффективно обездвижены как в лежачем положении, так и в положении лежа. Более того, эти акупунктурные точки были тщательно изучены и дают важную информацию для исследовательских целей 6,7.
Предыдущий метод обездвиживания одной крысы для экспериментов не только отнимал много времени, но и был труден для выполненияодним человеком. Кроме того, из-за отказа животных от сотрудничества вероятность успеха на практике относительно низкая. Поэтому существует острая необходимость в создании легко устанавливаемой животной модели со стабильными характеристиками для повышения эффективности эксперимента. В этой статье был представлен напечатанный на 3D-принтере держатель для мелких животных, который может легко обездвиживать нескольких грызунов, что приводит к ограничению движений. Целью данной работы является введение ЭА-терапии группе молодых крыс или мышей, уделяя особое внимание стратегиям массового ограничения мышей, идентификации и стимуляции акупунктурных точек MS6 и ST25.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Эксперименты в этом исследовании соответствуют принципу этики животных «3R» и были одобрены Комитетом по благополучию лабораторных животных и этнической принадлежности Армейского медицинского университета (AMUWEC20234543).
1. Подготовка устройства фиксации тела грызуна
- Разработка держателя для мелких животных на основе китайского патента на полезную модель9.
- Изготовьте устройство с помощью технологии 3D-печати.
- Подготовьте веревку длиной 2 м и разделите ее на 6 веревок. Проденьте эти 6 веревок через отверстия в фиксаторе. Используйте подпружиненную пряжку для закрепления концов веревки, облегчая регулировку размера петли.
ПРИМЕЧАНИЕ: Фиксатор может быть изготовлен любой компанией, оснащенной технологией 3D-печати на основе конструкторского чертежа. Конструктивный чертеж устройства показан на рисунке 1. Фиксатор, использованный в этом исследовании, был изготовлен на 3D-принтере методом печати, называемым моделированием методом наплавления (FDM), также известным как изготовление плавленого филамента (FFF)10. Этот метод аддитивного производства печатает детали дизайна слой за слоем, выборочно осаждая материал в расплавленном виде по заданной траектории. В процессе используются термопластичные полимеры, которые поставляются в виде нитей для создания окончательной физической структуры. Аппарат для иммобилизации, использованный в этом исследовании, может зафиксировать трех животных одновременно, требуя шести веревок, при этом для каждого животного требуется пара веревок: одна для шеи и одна для туловища.
2. Подготовка от грызунов
- Приобретите 3 крысы Sprague-Dawley (10-40 г, 7-45 дней) и 3 мыши C57 BL/C (5-40 г).
- Разводят животных в помещении со сменой дня и ночи 12 часов, температурой окружающей среды 21-23 °C и влажностью 45%-60%. Регулярно дезинфицируйте и проветривайте кормовую среду, а также позволяйте животным свободно есть и пить.
3. Фиксация грызунов к фиксатору (положение лежа)
- Поместите голову грызуна в U-образное отверстие перед фиксатором, при этом грызун находится в положении лежа. Пропустите тело грызуна через две веревочные петли.
- Закрепите веревки вокруг шеи и брюшка грызуна, следя за тем, чтобы он не мог вырваться, но не настолько туго, чтобы вызвать дыхательную недостаточность и смерть.
- Ключевым этапом является фиксация шеи на месте. Оставьте зазор 2-5 мм между шеей грызуна и веревкой. Убедитесь, что веревка не слишком тугая, чтобы животные не задушились, и не слишком свободная, чтобы убежать.
- Таким же образом зафиксируйте в устройстве остальных грызунов.
- Повторяйте описанные выше шаги фиксации (3.1-3.2) в течение 3 дней, чтобы свести к минимуму потенциальную реакцию на стресс, вызванную процедурой фиксации. Повторяйте процедуру фиксации в течение 3 дней подряд, при этом каждый сеанс длится 5 минут в день.
ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы грызуны не испытывали перенапряжения во время процедуры фиксации, мы повторяли процедуру в течение 3 дней подряд. Каждый сеанс длился 5 минут в день, предоставляя мышам или крысам достаточно времени, чтобы привыкнуть к процедуре и сводя к минимуму любой потенциальный дискомфорт. - Strat EA с 4-го дня.
- Чтобы предотвратить распространение болезни, погрузите стерильный ватный тампон или шарик в 75% спирт и тщательно протрите держатель, чтобы очистить и продезинфицировать его до и после каждого использования. Используйте перчатки и другие средства защиты, чтобы избежать потенциальных рисков для здоровья при контакте с грызунами.
4. Выполнение ЭА на мышах или молодых крысах (MS6)
- Выбирайте одноразовые стерильные иглы для акупунктуры размером 0,25 мм х 13 мм.
- Найдите акупунктурные точки по анатомическому расположению и подтвердите глубину введения в акупунктурной точке.
ПРИМЕЧАНИЕ: MS6 расположен на боковой стороне головы. Эта область в голове проходит через соединение между Shencong (Ex-hn1) и Xuanli (GB6), также известное как передняя теменная (Du21). MS6 соответствует экспрессии прецентральной извилины коры головного мозга на волосистой части головы. Ex-hn1 расположен на 0,5 см позади средней точки передне-задней срединной линии головы. GB6 расположен в средней точке передней части уха и в конце угла глаза. В ней распределены верхний надблоковый нерв, надглазничный нерв, затылочный нерв и ушно-височный нерв. MS6 в основном используется для лечения инсульта и энцефалопатии, таких как двигательные расстройства. - Медленно скручивают и вводят стерильные иглы двусторонними в MS6 на глубину 3/5 от переднего шэньчуна (Exhn1) до сюаньли (GB6) вдоль подкожной клетчатки у 3 грызунов соответственно.
- Подсоедините одну сторону соединительного кабеля к прибору EA.
- Подсоедините другую сторону соединительного кабеля, содержащего положительный и отрицательный зажимы EA, к хвостовикам акупунктурной иглы слева и справа MS6.
- Включите инструмент советника.
- Поверните кнопку (Функция/ Выберите переключатель), чтобы установить частоту и режим работы.
- Установите Частоту на 10 Гц и выберите режим Непрерывная волна .
- Поверните соответствующую кнопку (Adjust Intensity), чтобы установить интенсивность. Каждая кнопка регулировки интенсивности контролирует силу тока грызунов подключенного под ней провода. Отрегулируйте интенсивность тока до допустимого диапазона грызунов, обычно 1-2 мА, продолжительностью 5 мин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Важно следить за дыханием и поведением грызунов во время процедуры, чтобы убедиться, что они не испытывают никаких страданий или дискомфорта. Если крыса борется или испытывает боль, процедуру следует немедленно прекратить.
5. Фиксация грызунов к фиксатору (положение лежа на спине)
- Поместите головы грызуна в U-образное отверстие перед фиксатором, при этом грызун находится в положении лежа. Пропустите тело грызуна через две веревочные петли.
- Закрепите веревку вокруг шеи и брюшка грызуна, следя за тем, чтобы он не мог вырваться, но не настолько туго, чтобы вызвать дыхательную недостаточность и смерть.
ПРИМЕЧАНИЕ: Точки, которые необходимо отметить во время фиксации, такие же, как и в шаге 3.2. - Таким же образом зафиксируйте и других грызунов.
- Как и в шаге 3.4, повторяйте описанные выше шаги фиксации в течение 3 дней, чтобы снизить стрессовую реакцию грызунов.
- Strat EA с 4-го дня.
ПРИМЕЧАНИЕ: Дезинфекция выполняется, как указано в шаге 3.6.
6. Работающий советник (ST25)
- Выбирайте одноразовые стерильные иглы для акупунктуры размером 0,25 мм х 13 мм.
- Найдите акупунктурные точки по анатомическому расположению и подтвердите глубину введения в акупунктурной точке.
ПРИМЕЧАНИЕ: ST25 расположен на уровне пупка. Чтобы определить эту точку у грызунов, необходимо сначала измерить длину лапы грызуна. ST25 расположен на 2/3 длины лапы рядом с пупком. Например, если измеренная лапа грызуна составляет 0,6 см, то ST25 располагается по 0,4 см справа и слева от пупка. - Медленно скручивают и проталкивают стерильные иглы в ST25 двустороннюю на глубину 4-8 мм на 3 грызуна соответственно.
- Подсоедините одну сторону соединительного кабеля к прибору EA.
- Подсоедините другую сторону соединительного кабеля, содержащего положительный и отрицательный зажимы EA, к хвостовикам акупунктурной иглы слева и справа ST25.
- Включите инструмент советника.
- Поверните кнопку (Функция/ Выберите переключатель), чтобы установить частоту и режим работы.
- Установите частоту на 10 Гц и выберите режим непрерывной волны.
- Поверните соответствующую кнопку (Adjust Intensity), чтобы установить интенсивность. Каждая кнопка регулировки интенсивности управляет силой тока крысы провода, подключенного под ней. Отрегулируйте интенсивность тока до допустимого диапазона грызунов, обычно 1-2 мА, продолжительностью 5 мин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Наблюдения были такими же, как и на шаге 4.6.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
План этажа разработанного нами фиксатора тела животного показан на рисунке 1. Кроме того, была представлена 3D-графическая модель этого фиксатора для получения полного представления о конструкции (Дополнительный файл 1). Это устройство, которое позволяет обездвижить 3 грызуна и выполнять ЭА одновременно. Крысы и мыши были ограничены фиксатором в бодрствующем состоянии, и положения как лежа, так и лежа на спине могли быть надежно зафиксированы, не причиняя вреда грызунам (рис. 2 и рис. 3). С помощью фиксатора были успешно обнаружены и заколочены акупунктурные точки MS6 и ST25 у грызунов (рис. 4 и рис. 5).
Чтобы контролировать переменные и подтвердить эффективность этого подхода к фиксации, один экспериментатор обездвижил 3 крыс (Видео 1) или 3 мышей в трех последовательных испытаниях в сравнительном исследовании (Таблица 1). Полученные данные показали, что среднее время иммобилизации 3 крыс в положении лежа и лежа на спине с использованием этого инструмента составило 77,1 с ± 7,8 с и 74,9 с ± 8,6 с соответственно (среднее ± стандартное отклонение). Что касается 3 мышей, то среднее время иммобилизации в положении лежа и лежа на спине с использованием данного фиксатора составило 72,0 с ± 10,5 с и 62,3 ± 4,2 с соответственно (среднее ± стандартное отклонение). Обе группы крыс и мышей были успешно иммобилизованы на аппарате и не вырвались во время 5-минутной ЭА-терапии (рис. 2 и рис. 3). При интенсивности ЭА 1-2 мА мыши и крысы чувствовали себя комфортно и не сопротивлялись. Дыхание у мышей и крыс было стабильным, а внезапных смертей у животных не было. После лечения мыши и крысы оставались здоровыми и выживали.
Рисунок 1. План цеха фиксатора грызунов. (1) Устройство держателя грызунов, разделенное на три части. (2,3) Столбы: используются для фиксации конечностей мышей или молодых крыс. (4) Пещера: используется для фиксации головы. (5) Отверстие: используется для фиксации шеи молодых крыс. (6) Отверстие: используется для фиксации корпуса. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Фиксированные молодые крысы в положении лежа и на спине. (А-С) ЭА лечение акупунктурной точки MS6. (Д-Ж) ЭАС на акупунктурной точке ST25. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: Фиксированные мыши в положении лежа и лежа на спине. (А-С) Лечение ЭА на акупунктурной точке MS6. (Д-Ж) ЭАС на акупунктурной точке ST25. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4: MS6 в церебральной области. MS6 расположен на боковой стороне головы и расположен в точке соединения между Shencong (Ex-hn1) и Xuanli (GB6), которая также известна как передняя теменная область (Du21). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 5: Двусторонняя точка ST25 красного цвета. ST25 расположен на уровне пупка. Чтобы расположить эту точку у грызуна, необходимо сначала измерить длину лапы грызуна. ST25 расположен на 2/3 длины лапы рядом с пупком. Например, если измерение лапы грызуна составляет 0,6 см, то ST25 составляет 0,4 справа и слева от пупка. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
| Испытания | Крыс | Мышей | ||
| Положение лежа на животе | Положение лежа на спине | Положение лежа на животе | Положение лежа на спине | |
| (время в секундах) | (время в секундах) | (время в секундах) | (время в секундах) | |
| Испытание 1 | 75.5 | 65.1 | 60.2 | 62.3 |
| Испытание 2 | 70.2 | 80.3 | 80.1 | 70.6 |
| Испытание 3 | 85.5 | 79.5 | 75.7 | 65.9 |
| Среднее время (среднее ± стандартное отклонение) | 77,1 ± 7,8 | 74,9 ± 8,6 | 72,0 ± 10,5 | 62,3 ± 4,2 |
Таблица 1: Время, затрачиваемое на фиксацию крыс и мышей в положении лежа и лежа на спине. Данные (время в секундах) были получены одним экспериментатором, который обездвижил 3 крыс и 3 мышей в течение 3 последовательных испытаний соответственно. Среднее требуемое время определялось путем вычисления среднего значения и стандартного отклонения времени, затраченного на 3 испытания.
Дополнительный файл 1: Напечатанный на 3D-принтере файл фиксатора грызунов для ванны. Эту 3D-модель можно перетащить, чтобы получить полный обзор конструкции на 360°. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.
Видео 1: Видеоролик фиксации молодых крыс SD в положении лежа и лежа на спине, как подробно описано в условных обозначениях на рисунке 2 . На этом видео показано, как экспериментатор удерживает 3 крыс как в лежачем положении, так и в положении лежа. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать это видео.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Электроакупунктура (ЭА) - это форма иглоукалывания, которая включает в себя использование электрической стимуляции на акупунктурных иглах11. Данная методика предполагает использование микроимпульсных токов определенной интенсивности и частоты для стимуляции акупунктурных точек и достижения усиленного терапевтическогоэффекта3. Тем не менее, механизм исцеления ЭА ограничен и требует обширных фундаментальных исследований, чтобы доказать 1,2,3. Модели грызунов обычно используются в базовых исследованиях ЭА 8,12,13, и мы стремимся предоставить быстрый и эффективный метод проведения этих экспериментов на крысах и мышах.
В настоящее время эксперимент с советником сталкивается со многими проблемами. Основная задача состоит в том, чтобы эффективно обездвижить грызунов без анестезии. Стабильная иммобилизация животных имеет решающее значение и оказывает существенное влияние на исход эксперимента на животных. В остальном физиологические функции животных, находящихся под наркозом, отличаются от таковых у бодрствующих животных, и клиническое лечение иглоукалыванием всегда проводится на бодрствующих пациентах. Поэтому экспериментальные исследования на бодрствующих животных более практичны для клинических целей. Ранее предпочтительным методом была иммобилизация с помощью фиксирующей пластины, но она занимала много времени и позволяла оперировать только одного грызуна14. Традиционные иммобилайзеры также требовали связывания конечностей грызуна, что было трудоемким процессом и часто приводило к боли из-за плотного крепления. В нескольких исследованиях применялась клейкая лента для мышей, но их способность легко ускользать создает значительные проблемы, особенно во время процедур иглоукалывания8. Когда экспериментальных объектов больше, часто требуется пакетная операция для экономии времени и усилий2. Поэтому мы разработали 3D-печатный фиксатор для измельчения тела мелких животных, который имеет ряд преимуществ по сравнению с традиционными методами фиксации15: 1) он сокращает время фиксации, значительно повышая эффективность эксперимента16; 2) прост и удобен в использовании и не подвержен влиянию субъективных факторов15,16; 3) Это привело к снижению вреда для грызунов; 4) После фиксации операцию ЭА можно проводить на нескольких молодых крысах одновременно, экономя время и позволяя одновременно наблюдать за результатами лечения.
Использование технологии 3D-печати для экспериментальных исследований ЭА является ценным расширением в области исследований акупунктуры. Устройство может быть отрегулировано до любого размера при 3D-печати, что помогает проводить экспериментальную акупунктуру более эффективно. Моделирование методом наплавления (FDM), также известное как изготовление наплавленных нитей (FFF), метод аддитивного производства10, используется для 3D-печати фиксатора. Этот прибор подходит не только для данного эксперимента, но и для проведения экспериментов типа КТ или МРТ на грызунах17,18. Кроме того, он также может быть применен в любой ситуации, где необходима массовая фиксация, за исключением исследований советников. Благодаря распространенности технологии 3D-печати, это устройство легко доступно. Его можно сделать через местного производителя 3D-печати. Кроме того, это крепежное устройство может быть модифицировано и настроено на основе проектного чертежа. В данном исследовании фиксирующее устройство состоит из трех секций, каждая из которых способна зафиксировать одного грызуна. Если необходимо включить дополнительных грызунов или других животных, устройство можно масштабировать пропорционально, чтобы вместить большее количество. Например, он может быть разработан как устройство, которое может зафиксировать 5 мышей, или даже как фиксирующее устройство для других животных, таких как кролики.
Еще одна сложность заключается в том, чтобы найти акупунктурные точки у грызунов, которые соответствуют человеческим. Акупунктурные точки MS6 и ST25 были выбраны для изучения эффектов фиксации в положении лежа и лежа на спине. Более того, эти две акупунктурные точки изучались многими учеными 6,7,19. MS6 чаще всего используется в исследованиях заболеваний головного мозга, таких как болезнь Паркинсона, дисфункция после церебрального инсульта и т. д. 6,13,19. MS6 может улучшить неврологические функции крыс, страдающих ишемическим инсультом, путем модуляции сигнального пути JAK/STAT, который опосредован IL-12 впредыдущем исследовании. ST25 обычно используется для лечения желудочно-кишечного тракта, таких как диарея и синдром раздраженного кишечника (СРК)7,12. Предыдущее исследование показало, что ЭА, применяемая исключительно в точке ST25, показала потенциал для облегчения висцеральной гиперчувствительности, а также восстановления нормальной частоты медленных волн и ритма толстой кишки у крыс с СРК12. Эти две акупунктурные точки также способны надлежащим образом продемонстрировать эффекты положения лежа на спине и лежа у грызунов. Кроме того, эти две акупунктурные точки имеют значение отображения 6,7,19. Поскольку эти две акупунктурные точки изучались многими учеными, мы предоставляем протокол о том, как найти эти две акупунктурные точки у грызунов. Это полезно для экспериментов на животных, где проводятся исследования MS6 и ST25. Однако данное исследование имеет некоторые ограничения. Например, положение и глубина вставки иглы не могут быть объективно измерены и могут варьироваться в зависимости от уровня опыта оператора.
Наши эксперименты соответствуют принципу этики животных «3R» и были одобрены Комитетом по благополучию лабораторных животных и этническому сообществу Армейского медицинского университета. Самым сложным и ответственным шагом в этом эксперименте является поиск надежного и эффективного метода надежной иммобилизации грызунов. Это связано с тем, что любая попытка побега или гибель грызунов во время 5-минутной стимуляции ЭА приведет к провалу эксперимента. Дизайн передней пещеры основан на том, что грызуны предпочитают рыть ямы. Помещение головы грызунов внутрь пещеры призвано обеспечить психологический комфорт. Кроме того, веревки, используемые для крепления головы и тела грызунов, должны быть умеренно надежными, не оставаясь ни чрезмерно слабыми, ни чрезмерно натянутыми, чтобы избежать побега грызуна и предотвратить респираторный дистресс. После электростимуляции поведение и реакции грызунов тщательно отслеживались. В идеале при подаче тока 1-2 мА грызуны не должны проявлять агрессивной борьбы или вокализации в ответ на поражение электрическим током20. Фиксатор также можно использовать для фиксации грызунов в положении лежа на спине, лежа на животе и других видах фиксаций по мере необходимости. Он подходит для различных экспериментальных нужд, а операция фиксации проста в выполнении21. Тем не менее, это привело к ограничению, заключающемуся в том, что животные разных размеров нуждаются в специализированном иммобилизационном оборудовании разных размеров. Только животных с небольшими отклонениями в размерах можно удерживать с помощью того же устройства. Фиксатор иммобилизации периодического действия, используемый в данном протоколе, эффективно и надежно иммобилизует грызунов в пределах веса 10-40 г. Для животных, не входящих в этот весовой диапазон, необходимы индивидуальные фиксаторы иммобилизации в соответствии с их конкретными требованиями.
Кроме того, напечатанная на 3D-принтере серийная фиксация грызунов, используемая для массовых операций EA на грызунах, обеспечивает повышенную безопасность, поскольку она устойчива к царапинам и укусам грызунов. Исследования ЭА на грызунах дали ценную информацию о потенциальных преимуществах этого терапевтического метода у людей 1,2,3,6,7,11,14. Прибор полезен для продвижения экспериментальных научных исследований в ЭА. Эта методика позволяет исследователям проводить эксперименты на животных, требующие обездвиживания животных. Кроме того, на ней представлено точное местоположение ST25 и MS6, что может служить ориентиром для тех, кто изучает эти две акупунктурные точки в будущем. В конечном счете, ожидается, что эта методология приведет к созданию ценных моделей животных для исследований ЭА.
Описанный в этой статье фиксатор для мышей, напечатанный на 3D-принтере, предлагает простой и эффективный метод проведения экспериментов с ЭА на крысах или мышах. Его конструкция учитывает комфорт и безопасность животных, а также необходимость быстрой и эффективной фиксации. Это устройство может сэкономить время и усилия при проведении экспериментов на животных, способствуя развитию исследований в области электроакупунктуры и, в конечном итоге, приводя к более эффективному лечению различных заболеваний.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы заявили, что конкурирующих конфликтов интересов не существует.
Acknowledgments
Благодарим отделение нейрохирургии Второго филиала госпиталя Армейского медицинского университета за поддержку сайта. Финансирование: Работа выполнена при поддержке Фонда естественных наук Китая (82104696).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3D printing batch mice fixator | MESH INVENT | Custom made | The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF). |
| Electroacupuncture instrument | Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory | SDZ-III | www.Hwato-med.com |
| Disposable sterile acupuncture needle | Suzhou Medical Appliance Factory | N/A | 0.25 mm x 13 mm |
References
- Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
- Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
- Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
- Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
- Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
- Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson's disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
- Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
- Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
- A fixing device for mice body. China Patent. Zhifeng, W. , 202220586749 (2023).
- Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
- Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
- Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
- Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
- Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
- Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer's disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
- Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
- Gozzi, A., Zerbi, V.
- Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I.
- Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
- Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
- Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).
