Waiting
로그인 처리 중...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Bulk elektroakupunkturoperation för möss eller unga råttor

Published: September 1, 2023 doi: 10.3791/65648
* These authors contributed equally

Summary

Här presenterar vi ett protokoll för effektiv och snabb elektroakupunktur (EA) hos möss eller unga råttor med hjälp av en tredimensionell (3D) printad hållare. Denna teknik möjliggör samtidig drift på flera djur, vilket sparar tid och ökar experimenteffektiviteten.

Abstract

Elektroakupunktur (EA) används ofta för att behandla olika hälsotillstånd. Den underliggande mekanismen för EA-behandling är dock fortfarande oklar, vilket hindrar dess främjande. Den mekanistiska studien kräver mus- eller råttmodeller för att ta itu med detta problem. Dessa djur lyder dock inte den experimentella processen, vilket är tidskrävande. För att lösa dessa problem designade vi en 3D-printad bulkfixator för smådjurskroppar för att förbättra effektiviteten i EA:s djurförsök. Den här videon visar i detalj hur man använder fixatorn för att utföra bulk EA på möss eller unga råttor. För valet av akupunkter valdes den främre sneda linjen av vertex temporal (MS6 huvud) och Tianshu-punkten (ST25 mage) för att verifiera effekten av fixeringsanordningen med bukpositionering och ryggläge. Genom att använda den 3D-printade smådjurshållaren kan flera gnagare immobiliseras och behandlas samtidigt, vilket minskar den tid och de resurser som krävs för experimentet. Denna teknik kan tillämpas på andra djurmodeller genom 3D-utskrift i olika storlekar och kan potentiellt användas för olika fixeringsförhållanden. Enheten är fördelaktig för att främja experimentell vetenskaplig forskning inom EA.

Introduction

Elektroakupunkturterapi (EA) är en unik metod där akupunkturnålar sätts in i hårbotten och ansluts till en elektromaskin för att stimulera specifika punkter1. Till skillnad från manuell stimulering tillåter EA bättre kontroll av stimulering genom att stabilisera specifika frekvenser och vågformer för att uppnå optimala terapeutiska effekter2. Enligt en undersökning använder 81,2 % av de medicinska institutionerna i Kina EA eller manuell akupunktur för att behandla cerebral pares, neuralgi, ansiktspares och andra tillstånd. Trots dess popularitet är den specifika mekanismen för effekt av EA fortfarande okänd, vilket har hindrat dess främjande och tillämpning vid rehabilitering av neurologiska sjukdomar 1,2,3. Ytterligare forskning behövs för att fullt ut förstå mekanismen för EA:s effektivitet och för att främja dess användning vid rehabilitering av neurologiska sjukdomar.

I takt med att akupunkturens inflytande ökar över hela världen har många studier redan undersökt mekanismerna för EA som utförs på gnagarmodeller, såsom rått- eller musmodeller 1,2,3. Flera problem uppstår ofta i EA:s gnagarexperiment. Den första är hur man immobiliserar gnagare utan bedövning, eftersom akupunktur som utförs på vakna försökspersoner är mer reflekterande av klinisk praxis. Dessutom kräver vissa försök att djuren är vakna för att observera behandlingseffekter 2,3. En annan utmaning är att exakt lokalisera akupunkterna hos möss eller råttor som motsvarar dem hos människor. Den exakta lokaliseringen av akupunkter i experimentella gnagare studeras för närvarande av många forskare 4,5. I detta protokoll valdes MS6 och ST25, som tydligt har definierats hos gnagare genom omvandlingen av mänsklig anatomisk lokalisering. MS6 används ofta för behandling av vissa hjärnsjukdomar, såsom Parkinsons sjukdom6. ST25 används vanligtvis för att behandla gastrointestinala problem, såsom diarré7. Dessa två akupunkter valdes främst för att visa hur gnagare effektivt kan immobiliseras i både ryggläge och liggande läge. Dessutom har dessa akupunkter studerats ingående och erbjuder betydande insikter för forskningsändamål 6,7.

Den tidigare metoden att immobilisera en enda råtta för experiment är inte bara tidskrävande utan också svår att hantera av en enda person8. Dessutom, på grund av djurens bristande samarbete, är framgångsfrekvensen relativt låg i praktiken. Därför finns det ett kritiskt behov av att skapa en lättetablerad djurmodell med stabila egenskaper för att förbättra försökseffektiviteten. I den här artikeln introducerades en 3D-printad hållare för smådjur som lätt kunde immobilisera flera gnagare, vilket ledde till motorisk begränsning. Syftet med denna artikel är att administrera EA-behandlingar till en grupp unga råttor eller möss, med fokus på strategierna för bulkbegränsning av möss, identifiering och stimulering av MS6- och ST25-akupunkter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Experimenten i denna studie överensstämmer med "3R"-principen för djuretik och har godkänts av Laboratory Animal Welfare and Ethnic Committee of the Army Medical University (AMUWEC20234543).

1. Förberedelse av kroppsfixeringsanordning för gnagare

  1. Designa en hållare för smådjur baserad på det kinesiska bruksmodellpatentet9.
  2. Producera enheten genom 3D-utskriftsteknik.
  3. Förbered ett 2 m långt rep och dela det i 6 rep. Trä dessa 6 rep genom hålen i fixatorn. Använd det fjäderbelastade spännet för att fästa repändarna, vilket underlättar justering av öglans storlek.
    OBS: Fixatorn kan tillverkas av vilket företag som helst som är utrustat med 3D-utskriftsteknik baserat på en designritning. Enhetens konstruktionsritning visas i figur 1. Fixatorn som användes i denna studie tillverkades av en 3D-skrivare med en utskriftsmetod som kallas fused deposition modeling (FDM), även känd som fused filament fabrication (FFF)10. Denna additiva tillverkningsmetod skriver ut delarna av designen lager för lager genom att selektivt deponera materialet i smält form i en förutbestämd bana. Processen använder termoplastiska polymerer som kommer i filament för att skapa den slutliga fysiska strukturen. Immobiliseringsapparaten som används i denna studie kan säkra tre djur samtidigt, vilket kräver sex rep, där varje djur kräver ett par rep: ett för nacken och ett för bålen.

2. Beredning av gnagare

  1. Köp 3 Sprague-Dawley-råttor (10-40 g, 7-45 dagar gamla) och 3 C57 BL/C-möss (5-40 g).
  2. Föd upp djur i ett rum med en 12 timmars dag/natt-cykel, en omgivningstemperatur på 21-23 °C och en luftfuktighet på 45%-60%. Desinficera och ventilera utfodringsmiljön regelbundet och låt djuren äta och dricka fritt.

3. Fixering av gnagare på fixatorn (bukläge)

  1. Placera gnagarens huvud i det U-formade hålet framför fixatorn, med gnagaren i bukläge. För gnagarens kropp genom två repöglor.
  2. Fäst repen runt gnagarens hals och buk och se till att den inte kan fly, men inte så hårt att den orsakar andningsbesvär och död.
    1. Det viktigaste steget är att fixera halsen på plats. Lämna ett mellanrum på 2-5 mm mellan gnagarens hals och repet. Se till att repet inte är för hårt spänt för att djuren ska kunna strypas eller för löst för att komma ut.
  3. Fixera de andra gnagarna på samma sätt i enheten.
  4. Upprepa ovanstående fixeringssteg (3.1-3.2) i 3 dagar för att minimera den potentiella stressreaktionen som orsakas av fixeringsproceduren. Upprepa fixeringsproceduren i 3 dagar i följd, där varje session varar 5 minuter per dag.
    OBS: För att säkerställa att gnagare inte var överstressade under fixeringsproceduren upprepade vi proceduren i 3 dagar i följd. Varje session varade i 5 minuter per dag, vilket gav gott om tid för möss eller råttor att acklimatisera sig till proceduren och minimera eventuellt obehag.
  5. Strat EA från dag 4.
  6. För att förhindra spridning av sjukdomar, sänk ner en steril bomullspinne eller boll i 75 % alkohol och torka av hållaren noggrant för att rengöra och desinficera den före och efter varje användning. Använd handskar och annan skyddsutrustning för att undvika potentiella hälsorisker vid hantering av gnagare.

4. Utföra EA på möss eller unga råttor (MS6)

  1. Välj 0,25 mm x 13 mm sterila engångsakupunkturnålar.
  2. Hitta akupunkterna efter anatomisk plats och bekräfta insättningsdjupet vid akupunkten.
    OBS: MS6 är placerad på sidan av huvudet. Denna region i huvudet passerar genom förbindelsen mellan Shencong (Ex-hn1) och Xuanli (GB6), även känd som den främre parietalen (Du21). MS6 motsvarar uttrycket av den precentrala gyrusen i hjärnbarken i hårbotten. Ex-hn1 ligger 0,5 cm bakom mittpunkten på huvudets främre-bakre mittlinje. GB6 är placerad i mitten av örats framsida och ögats ändvinkel. Den överlägsna supratrochlearnerven, supraorbitalnerven, occipitalnerven och auriculotemporalnerven är fördelade i den. MS6 används främst för att behandla stroke och encefalopati, såsom motoriska störningar.
  3. Vrid långsamt och sätt in sterila nålar bilateralt i MS6 på ett djup av 3/5 från den främre Shenchong (Exhn1) till Xuanli (GB6) längs subkutan hos 3 gnagare.
  4. Anslut ena sidan av anslutningskabeln till EA-instrumentet.
  5. Anslut en annan sida av anslutningskabeln som innehåller de positiva och negativa EA-klämmorna till akupunkturnålens skaft på vänster och höger MS6.
  6. Slå på EA-instrumentet.
    1. Vrid på knappen (Funktion/Välj omkopplare) för att ställa in frekvens och funktionsläge.
    2. Ställ in frekvensen på 10 Hz och välj ett kontinuerligt vågläge .
    3. Vrid på motsvarande knapp (Justera intensitet) för att ställa in intensiteten. Varje knapp för justering av intensitet styr den aktuella styrkan hos gnagarna i tråden som är ansluten under den. Justera strömintensiteten till det acceptabla intervallet för gnagare, vanligtvis 1-2 mA, som varar i 5 minuter.
      OBS: Det är viktigt att övervaka gnagarnas andning och beteende under proceduren för att säkerställa att de inte upplever någon ångest eller obehag. Om råttan verkar kämpa eller ha ont ska proceduren avbrytas omedelbart.

5. Fixering av gnagare på fixatorn (ryggläge)

  1. Placera gnagarens huvuden i det U-formade hålet framför fixatorn, med gnagaren i bukläge. För gnagarens kropp genom två repöglor.
  2. Fäst repet runt gnagarens hals och buk och se till att den inte kan fly, men inte så hårt att den orsakar andningsbesvär och död.
    OBS: Punkterna som ska noteras under fixeringen är desamma som i steg 3.2.
  3. Fixa de andra gnagarna på samma sätt.
  4. Som i steg 3.4, upprepa ovanstående fixeringssteg i 3 dagar för att minska stressresponsen hos gnagare.
  5. Strat EA från dag 4.
    OBS: Desinfektion utförs enligt beskrivningen i steg 3.6.

6. Utförande EA (ST25)

  1. Välj 0,25 mm x 13 mm sterila engångsakupunkturnålar.
  2. Hitta akupunkterna efter anatomisk plats och bekräfta insättningsdjupet vid akupunkten.
    OBS: ST25 är placerad i nivå med naveln. För att placera denna punkt hos gnagare måste man först mäta längden på gnagarens tass. ST25 är placerad på 2/3 av tassens längd bredvid naveln. Till exempel, om gnagarens uppmätta tass är 0,6 cm, är ST25 placerad 0,4 cm till höger och vänster om naveln.
  3. Vrid och penetrera långsamt sterila nålar i ST25 bilateralt på ett djup av 4-8 mm på 3 gnagare respektive.
  4. Anslut ena sidan av anslutningskabeln till EA-instrumentet.
  5. Anslut en annan sida av anslutningskabeln som innehåller de positiva och negativa EA-klämmorna till akupunkturnålens skaft på vänster och höger ST25.
  6. Slå på EA-instrumentet.
    1. Vrid på knappen (Funktion/Välj omkopplare) för att ställa in frekvens och funktionsläge.
    2. Ställ in frekvensen på 10 Hz och välj Kontinuerligt vågläge.
    3. Vrid på motsvarande knapp (Justera intensitet) för att ställa in intensiteten. Varje knapp för justering av intensitet styr strömstyrkan hos råttan på tråden som är ansluten under den. Justera strömintensiteten till det acceptabla intervallet för gnagare, vanligtvis 1-2 mA, som varar i 5 minuter.
      OBS: Observationerna var desamma som i steg 4.6.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Planritningen för djurkroppsfixatorn vi designade visas i figur 1. Dessutom lämnades en 3D-grafisk modell av denna fixator in för att ge en heltäckande bild av konstruktionen (Supplementary File 1). Detta är en enhet som gör att 3 gnagare kan immobiliseras och utföra EA samtidigt. Råttor och möss var begränsade till fixatorn i vaket tillstånd, och både bukläge och ryggläge kunde fixeras ordentligt utan att orsaka skada på gnagarna (Figur 2 och Figur 3). Med hjälp av fixatorn lyckades man lokalisera och sticka in MS6- och ST25-akupunkterna i gnagare (Figur 4 och Figur 5).

För att kontrollera variabler och validera effektiviteten av denna fixeringsmetod immobiliserade en försöksledare 3 råttor (video 1) eller 3 möss i tre på varandra följande försök i en jämförande studie (tabell 1). Fyndet visade att den genomsnittliga tiden för immobilisering av 3 råttor i bukläge och ryggläge med detta verktyg var 77,1 s ± 7,8 s respektive 74,9 s ± 8,6 s (medelvärde ± SD). För 3 möss var den genomsnittliga immobiliseringstiden i bukläge och ryggläge med denna fixator 72,0 s ± 10,5 s respektive 62,3 ± 4,2 s (medelvärde ± SD). Båda grupperna av råttor och möss immobiliserades framgångsrikt på enheten och flydde inte under den 5 minuter långa EA-behandlingen (figur 2 och figur 3). Vid 1-2 mA EA-intensitet kände sig möss och råttor bekväma och kämpade inte våldsamt. Andningen hos möss och råttor var stabil och inga plötsliga dödsfall inträffade hos djur. Efter behandling förblev mössen och råttorna friska och överlevde.

Figure 1
Figur 1. Batch gnagarfixator planlösning. (1) Anordning för hållare av gnagare, uppdelad i tre delar. (2,3) Pelare: används för att fixera lemmar på möss eller unga råttor. (4) Grotta: används för att fixera huvudet. (5) Hål: används för att fixera halsen på unga råttor. (6) Hål: används för att fixera kroppen. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 2
Figur 2: Fixerade unga råttor i bukläge och ryggläge. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (D-F) EA-behandling på ST25 akupunkt. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 3
Figur 3: Fixerade möss i bukläge och ryggläge. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (D-F) EA-behandling på ST25 akupunkt. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 4
Figur 4: MS6 i hjärnregionen. MS6 är placerad på den laterala sidan av huvudet och är placerad vid anslutningspunkten mellan Shencong (Ex-hn1) och Xuanli (GB6), som också är känd som den främre parietala (Du21) regionen. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 5
Figur 5: ST25 bilateral punkt i rött. ST25 ligger i nivå med naveln. För att placera denna punkt i gnagare måste man först mäta längden på gnagarens tass. ST25 är placerad på 2/3 av tassens längd bredvid naveln. Till exempel, om gnagarens mättass är 0,6 cm, är ST25 0,4 till höger och vänster om naveln. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Prövningar Råttor Möss
Bukläge Ryggläge Bukläge Ryggläge
(tid i sekunder) (tid i sekunder) (tid i sekunder) (tid i sekunder)
Prövning 1 75.5 65.1 60.2 62.3
Prövning 2 70.2 80.3 80.1 70.6
Prövning 3 85.5 79.5 75.7 65.9
Genomsnittlig tid (genomsnittlig ± SD) 77,1 ± 7,8 74,9 ± 8,6 72,0 ± 10,5 62,3 ± 4,2

Tabell 1: Tid som ägnats åt att fixera råttor och möss i buk- och ryggläge. Data (tid i sekunder) erhölls av en försöksledare som immobiliserade 3 råttor och 3 möss i 3 på varandra följande försök. Den genomsnittliga tidsåtgången bestämdes genom att beräkna medelvärdet och standardavvikelsen för den tid det tog för de 3 försöken.

Tilläggsfil 1: 3D-printad designfil för fixator för badgnagare. Den här 3D-modellen kan dras för att få en fullständig 360°-vy av designen. Klicka här för att ladda ner den här filen.

Video 1: Film av fixering av mage och ryggläge hos unga SD-råttor, som beskrivs i detalj i figur 2-förklaringen . Den här videon visar en försöksledare som håller fast 3 råttor i både ryggläge och bukläge. Klicka här för att ladda ner den här videon.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Elektroakupunktur (EA) är en form av akupunktur som innebär användning av elektrisk stimulering på akupunkturnålar11. Denna teknik innebär användning av mikropulsströmmar av specifik intensitet och frekvens för att stimulera akupunkturpunkter och uppnå förbättrade terapeutiska effekter3. EA:s mekanism för läkning är dock begränsad och kräver omfattande grundforskning för att bevisa 1,2,3. Gnagarmodeller används ofta i grundläggande EA-studier 8,12,13, och vi strävar efter att tillhandahålla en snabb och effektiv metod för att utföra dessa experiment på råttor och möss.

För närvarande står EA-experimentet inför många utmaningar. Den främsta utmaningen är att effektivt immobilisera gnagare utan bedövning. Stabil immobilisering av djur är avgörande och har en betydande inverkan på resultatet av djurförsöket. I övrigt skiljer sig de fysiologiska funktionerna hos sövda djur från de hos vakna djur, och klinisk akupunkturbehandling utförs alltid på vakna patienter. Därför är experimentella studier med vakna djur mer praktiska för kliniska ändamål. Tidigare var immobilisering med en fixeringsplatta den föredragna metoden, men det var tidskrävande och tillät endast drift av en enda gnagare14. Traditionella startspärrar krävde också att gnagarens lemmar bands upp, vilket var en tidskrävande process och ofta resulterade i smärta på grund av den åtdragna fastsättningen. Flera studier har implementerat tejp för möss, men deras förmåga att lätt fly innebär betydande utmaningar, särskilt under akupunkturprocedurer8. När det finns fler försökspersoner krävs ofta batchdrift för att spara tid och ansträngning2. Därför har vi utvecklat en 3D-printad satsfixator för små djurkroppar som erbjuder flera fördelar jämfört med traditionella fixeringsmetoder15: 1) det förkortar fixeringstiden, vilket avsevärt förbättrar den experimentella effektiviteten16; 2) den är enkel och lätt att använda och påverkas inte av subjektiva faktorer15,16; 3) Det ledde mindre skadligt för gnagare; 4) När EA-operationen har fixerats kan den utföras på flera unga råttor samtidigt, vilket sparar tid och gör det möjligt att samtidigt observera behandlingsresultaten.

Användningen av 3D-utskriftsteknik för experimentella studier av EA är en värdefull expansion inom akupunkturforskningen. Enheten kan justeras till valfri storlek när den 3D-printas, vilket hjälper experimentell akupunktur att utföras mer effektivt. Fused deposition modeling (FDM), även känd som fused filament fabrication (FFF), en additiv tillverkningsmetod10, används för 3D-utskrift av fixatorn. Denna enhet är lämplig inte bara för detta experiment utan också för att utföra experiment som CT eller MRT på gnagare17,18. Dessutom kan den också tillämpas på alla situationer där bulkfixering behövs, förutom EA-studier. På grund av förekomsten av 3D-utskriftsteknik är den här enheten lättillgänglig. Det kan göras genom en lokal 3D-utskriftstillverkare. Dessutom kan denna fästanordning modifieras och anpassas baserat på designritningen. I denna studie består fixeringsanordningen av tre sektioner som var och en kan fixera en enda gnagare. Om ytterligare gnagare eller andra djur behöver inkluderas kan enheten skalas proportionellt för att rymma det större antalet. Den kan till exempel utformas som en anordning som kan fixera 5 möss eller till och med som en fixeringsanordning för andra djur som kaniner.

En annan utmaning är att hitta akupunkter hos gnagarna som motsvarar människans. MS6 och ST25 akupunkter valdes för att undersöka effekterna av buk- och ryggfixering. Dessutom har dessa två akupunkter studerats av många forskare 6,7,19. MS6 används oftast inom forskning om hjärnsjukdomar, såsom Parkinsons sjukdom, dysfunktion efter hjärnstroke, etc 6,13,19. MS6 kan förbättra den neurologiska funktionen hos råttor som lider av ischemisk stroke via modulering av JAK/STAT-signalvägen som medieras av IL-12 i en tidigare studie13. ST25 används vanligtvis för behandling av mag-tarmkanalen, såsom diarré och irritabel tarm (IBS)7,12. En tidigare studie har rapporterat att EA applicerat enbart vid ST25-punkten visade potentialen att lindra visceral överkänslighet samtidigt som den återställde normal långsamma vågfrekvens och kolonrytm hos IBS-råttor12. Dessa två akupunkter kan också på ett lämpligt sätt demonstrera effekterna av ryggläge och bukläge hos gnagare. Dessa två akupunkter har också betydelsen av visning 6,7,19. Eftersom dessa två akupunkter har studerats av många forskare, tillhandahåller vi ett protokoll för hur man lokaliserar dessa två akupunkter hos gnagare. Det är användbart för djurförsök där MS6- och ST25-studier utförs. Den aktuella studien har dock vissa begränsningar. Till exempel kan nålens position och stickdjup inte mätas objektivt och kan variera beroende på operatörens erfarenhetsnivå.

Våra experiment följer "3R"-principen för djuretik och har godkänts av Laboratory Animal Welfare and Ethnic Committee of the Army Medical University. Det mest utmanande och avgörande steget i detta experiment är att hitta en pålitlig och effektiv metod för att på ett säkert sätt immobilisera gnagare. Detta beror på att varje försök att fly eller döda gnagarna under 5-minuters EA-stimulering kommer att resultera i att experimentet misslyckas. Utformningen av den främre grottan drar nytta av gnagarnas förkärlek för att gräva hål. Att placera gnagarnas huvud i grottan är avsett att ge psykologisk komfort. Dessutom bör de rep som används för att fästa gnagarnas huvud och kropp vara måttligt säkra, och varken vara alltför slappa eller alltför spända för att undvika att gnagaren rymmer och förhindra andningssvårigheter. Efter elektrisk stimulering övervakades gnagarnas beteenden och reaktioner noggrant. Helst, när man applicerar en ström på 1-2 mA, skulle gnagare inte uppvisa aggressiva kamper eller vokaliseringar som svar på elektriska stötar20. Fixatorn kan också användas för att fixera gnagare i ryggläge, liggande positioner och andra typer av fixeringar efter behov. Den är lämplig för en mängd olika experimentella behov, och fixeringsoperationen är lätt att utföra21. Detta har dock lett till en begränsning av att djur av varierande storlek kräver skräddarsydd immobiliseringsutrustning av varierande storlek. Endast djur med små storleksavvikelser kan hållas fast med samma anordning. Den satsvisa immobiliseringsfixatorn som används i detta protokoll immobiliserar effektivt och tillförlitligt gnagare inom viktintervallet 10-40 g. För djur utanför detta viktintervall behövs anpassade satsimmobiliseringsfixatorer för att passa deras specifika krav.

Dessutom erbjuder den 3D-printade batchfixeringen av gnagare som används för EA-operationer på gnagare ökad säkerhet eftersom den är resistent mot repor och bett från gnagare. Studier av EA på gnagare har gett värdefulla insikter om de potentiella fördelarna med denna terapeutiska modalitet hos människor 1,2,3,6,7,11,14. Enheten är fördelaktig för att främja experimentell vetenskaplig forskning inom EA. Denna teknik gör det möjligt för forskare att utföra djurförsök som kräver immobilisering av djur. Dessutom presenterar den den exakta platsen för ST25 och MS6, som kan fungera som referens för dem som studerar dessa två akupunkter i framtiden. I slutändan förväntas denna metodik leda till värdefulla djurmodeller för EA-forskning.

Den 3D-printade satsfixatorn för möss som beskrivs i detta dokument erbjuder en enkel och effektiv metod för att utföra EA-experiment på råttor eller möss. Dess design tar hänsyn till djurens komfort och säkerhet, såväl som behovet av snabb och effektiv fixering. Denna enhet har potential att spara tid och ansträngning vid genomförande av djurförsök, främja utvecklingen av elektroakupunkturforskning och i slutändan leda till bättre behandlingar för olika sjukdomar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna förklarade att det inte finns några konkurrerande intressekonflikter.

Acknowledgments

Tack till avdelningen för neurokirurgi vid det andra anslutna sjukhuset vid Army Medical University för stöd på plats. Finansiering: Detta arbete stöddes av Natural Science Foundation of China (82104696).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3D printing batch mice fixator MESH INVENT Custom made The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF).  
Electroacupuncture instrument Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory SDZ-III www.Hwato-med.com
Disposable sterile acupuncture needle Suzhou Medical Appliance Factory N/A 0.25 mm x 13 mm

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
  2. Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
  3. Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
  4. Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
  5. Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
  6. Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson's disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
  7. Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
  8. Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
  9. A fixing device for mice body. China Patent. Zhifeng, W. , 202220586749 (2023).
  10. Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
  11. Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
  12. Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
  13. Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
  14. Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
  15. Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer's disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
  16. Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
  17. Gozzi, A., Zerbi, V. Modeling brain dysconnectivity in rodents. Biological Psychiatry. 93 (5), 419-429 (2023).
  18. Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I. MRI in rodent models of brain disorders. Neurotherapeutics. 8 (1), 3-18 (2011).
  19. Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
  20. Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
  21. Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).

Tags

Bulk elektroakupunktur Möss Unga råttor EA-behandling Mekanistisk studie 3D-printad Small Animal Body Bulk Fixator Djurförsök Akupunkter Fixeringsanordning Benägen positionering Liggande positionering Immobiliserad Experimentell vetenskaplig forskning
Bulk elektroakupunkturoperation för möss eller unga råttor
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Yao, S., Wei, Y., Zhang, Y., Yang,More

Yao, S., Wei, Y., Zhang, Y., Yang, X., Wu, Z. Bulk Electroacupuncture Operation for Mice or Young Rats. J. Vis. Exp. (199), e65648, doi:10.3791/65648 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter