Fijación de etanol y tinción dapi: un método para visualizar el ADN en C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Clarke, E. K., et al. Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2018).
Aquí, describimos una técnica utilizada para visualizar el ADN genómico en nematodos fijos e intactos. El video incluye un protocolo de ejemplo para contar cromatina en ocitos C. elegans no fertilizados.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Clarke et al, Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Las cepas tetraploides se pueden validar contando el número de cromosomas en sus ócitos no fertilizados. La microscopía fluorescente se puede utilizar para detectar el número de pares cromosómicos en ocitos diploides no fertilizados (antes de las divis…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).