Fixation de l’éthanol et coloration DAPI : une méthode pour visualiser l’ADN chez C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Clarke, E. K., et autres manipulation de Ploidy à Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2018).
Ici, nous décrivons une technique utilisée pour visualiser l’ADN génomique dans des nématodes fixes et intacts. La vidéo comprend un protocole d’exemple pour compter la chromatine dans les ovocytes C. elegans non fécondés.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Clarke et coll., Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Les souches tétraploïdes peuvent être validées en comptant le nombre de chromosomes dans leurs ovocytes non fécondés. La microscopie fluorescente peut être utilisée pour dépister le nombre de paires chromosomiques dans les ovocytes diploïdes non …
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).