In Vivo Elektroporasjon: En stedsspesifikk metode for transfekt sebrafisk
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Durovic, T., et al. Elektroporasjonsmetode for In Vivo Levering av Plasmid DNA i Voksen Sebrafish Telencephalon. J. Vis. Uttr. (2019).
Denne videoen beskriver in vivo elektroporasjon, som er en teknikk for DNA-levering i ependymogliale celler i voksen sebrafisk.
Protocol
1. Elektroporasjon Fjern fisken fra injeksjonsoppsettet mens du fortsatt holder den i svampen. Senk innsiden av elektrodens spiss ned i ultralydgelen. Dekk fisken telencephalon med en liten mengde ultralydgel. Plasser fiskehodet mellom elektrodene, plasser den positive elektroden på ventralsiden av fiskens hode og den negative elektroden på dorsalsiden (figur 1C), mens du fortsatt holder fiskens kropp i svampen. Dette setter retningen på strømmen av strømmen s…
Representative Results
Figur 1: Skjematisk fremstilling av koronaldelen av den everted sebrafisk telencephalon. (A) Ordning av en koronal del av sebrafisk telencephalon, fremhever posisjonen til ependymogliale celler, som fôrer ventrikkeloverflate og bygger den ventrale ventrikkelveggen. Dorsal ependymal lag bygger bro mellom de to halvkule og dekker ventrikelen (V), som ligger mellom to cellelag: ependymoglial og ependymal. (…
Materials
| Ultrasound gel | SignaGel, Parker laboratories INC | 15-60 | Electrode Gel |
| BTX Tweezertrodes Electrodes | Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus | 45-0486 | 1mm diameter |
| Electroporation device | BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus | 45-0662 |
Cite This Article
In Vivo Electroporation: A Site-Specific Method to Transfect Zebrafish. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20193, doi: (2023).