Pseudofracture: eine akute periphere Gewebe Trauma-Modell
Summary
Pseudofracture, eine reproduzierbare Mausmodell der sterile Muskel-Skelett-Verletzungen, können zur Beurteilung der späten Begriff posttraumatische Immunantwort. Dieser Artikel beschreibt die verfahrensrechtlichen Ausführung des Modells Schritt für Schritt, einschließlich des Potenzials für experimentelles Modell Kombinationen Studie Polytrauma ermöglichen.
Abstract
Nach Trauma gibt es eine frühe hyper-reaktive entzündliche Reaktion, die zu Multiorganversagen und hoher Sterblichkeit in Trauma-Patienten führen können; diese Reaktion wird häufig durch eine verzögerte Immunsuppression, dass die klinischen Komplikationen der Infektion fügt begleitet und auch die Sterblichkeit erhöhen 1-9. Viele Studien haben begonnen, diese Veränderungen in der Reaktivität des Immunsystems zu bewerten nach einem Trauma. 10-15
Immunologische Studien sind stark durch die Vielzahl von transgenen und Knockout-Mäusen für in vivo Modelle unterstützt;. Diese Stämme Hilfe in detaillierte Untersuchungen zu den molekularen Mechanismen bei der immunologischen Reaktionen beteiligt bewerten 16-21
Die Herausforderung in der experimentellen murinen Trauma Modellierung ist langfristig Untersuchung, wie Frakturfixation Techniken in Mäusen, kann komplex und nicht leicht reproduzierbar. 22-30
Diese pseudofracture Modell, eine leicht reproduziert Trauma-Modell, überwindet diese Schwierigkeiten durch immunologisch imitieren einer Extremität Bruch Umgebung, während gleichzeitig die Bewegungsfreiheit der Tiere und das langfristige Überleben ohne die kontinuierliche, lang anhaltende Anwendung von Betäubungsmitteln. Die Absicht ist es, die Merkmale des Röhrenknochenfrakturen neu; verletzten Muskel-und Weichgewebe, um beschädigte Knochen und Knochenmark, ohne die nativen Knochen freigelegt.
Die pseudofracture Modell besteht aus zwei Teilen: einem bilateralen Muskel Quetschverletzung auf die Hinterbeine, durch Injektion eines Knochens Lösung in dieser verletzte Muskeln gefolgt. Der Knochen-Lösung wird von der Ernte der langen Röhrenknochen von beiden Hinterbeine eines alters-und Gewichts-abgestimmt syngenen Spenders vorbereitet. Diese Knochen sind dann zerkleinert und suspendiert in Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung bis auf die Knochen-Lösung zu schaffen.
Bilaterale Femurfraktur ist eine häufig verwendete und bewährte Modell der Extremitäten Trauma, und war die vergleichende Modell bei der Entwicklung des pseudofracture Modell. Unter der Vielzahl der zur Verfügung stehenden Bruch Modelle, entschieden wir uns zu einer geschlossenen Methode der Fraktur mit Weichteilschaden wie unser Vergleich zu den pseudofracture verwenden, da wir eine sterile noch verhältnismäßig schweren peripheren Gewebe Trauma-Modell wollte. 31
Hämorrhagischen Schock ist ein häufiger Befund bei der Festlegung von schweren Traumata, und die globale Hypoperfusion fügt ein sehr relevantes Element auf ein Trauma-Modell. 32-36 Die pseudofracture Modell leicht mit einem hämorrhagischen Schock-Modell für ein Polytrauma-Modell mit hohem Schweregrad kombiniert werden . 37
Protocol
Discussion
Pseudofracture, eine reproduzierbare Mausmodell der sterile Muskel-Skelett-Verletzungen, können zur Beurteilung der posttraumatischen Immunantwort. Die pseudofracture Modell immunologisch ahmt einer Extremität Bruch Umwelt durch Nachbildung der Eigenschaften einer langen Knochenbruch: verletzte Muskel-und Weichgewebe, um beschädigte Knochen und Knochenmark, ohne die nativen Knochen freigelegt 38,39 A biphasischen Immunantwort gesehen werden folgende sein. pseudofracture Trauma, das von einem frühen hyperi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Funding Source / Anzahl Molekularbiologie des hämorrhagischen Schocks GM053789
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Surgical blue pad | Fisher Scientific | 50-7105 | ||
| Sterile Field dressings | Fisher Scientific | NC9517505 | ||
| Circulating heating pad 18″x26″ | Harvard | py872-5272 | ||
| Hot bead instrument sterilizer | VWR | 11156-002 | ||
| Stainless steel tray 8″ x 11″ | VWR | 62687-049 | ||
| Plexiglass boards (10x15x0.5cm) | University of Pittsburgh Machine shop | |||
| Tape rolls 1″ | Corporate Express | MMM26001 | ||
| 50cc conical tube | can be purchased through any global vendor | |||
| Straight side wide mouth jars (used as cap for nose cone) | VWR | 159000-058 | ||
| Oster A5 clippers w. size 40 blade | VWR | 10749-020 | ||
| Surgical scissors (straight – 12cm) | Fine Science Tools | 14068-12 | ||
| Hemostats curved -18cm | Harvard | 81331718 | ||
| Forceps (0.8mm-tip, curved-10cm) | Fine Science Tools | 11050-10 | ||
| Gauze 4″x4″ | can be purchased through any global vendor | |||
| 1.5cc microfuge tube | can be purchased through any global vendor | |||
| Ice bucket | can be purchased through any global vendor | |||
| Mortar and Pestle | Fisher | 12-961AA | ||
| 1cc syringe w/ 25G needle | Fisher Scientific | 14-826-88 | ||
| 20G needle | can be purchased through any global vendor | |||
| 1mL pipetteman | can be purchased through any global vendor | |||
| 1mL pipette tips | can be purchased through any global vendor | |||
| Falcon polystyrene 8ml tubes | VWR | 60819-331 | ||
| Sterilization pouch 3″x8″ | VWR | 24008 | ||
| Sterilization pouch 5″x10″ | VWR | 24010 | ||
| MacConkey II Agar plate | BD Biosciences | 221172 | ||
| Ethyl Alcohol – 200 proof | Pharmaco-AAPER | [70%] | ||
| Pentobarbital Sodium (Nembutol Sodium Solution) | Ovation | 70mg/kg | ||
| Aerrane (Isoflurane) | Baxter | 99.9% | ||
| Triadine Povidone Iodine (Betadine) | Triad disposables | |||
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | ||||
| Buprenorphine HCl | Bedford Laboratories | 0.1mg/kg |
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