Die Aufrechterhaltung Wolbachia in zellfreien Medium

Summary

Dieses Video beschreibt ein Verfahren zur Reinigung von Wolbachia pipientis von einer Anopheles gambiae Zelllinie und dann Kultivierung des Endosymbionten in zellfreien Medium. Ein Test für die Lebensfähigkeit des Bakteriums nachgewiesen ist.

Abstract

In diesem Video-Protokoll, sind Verfahren nachgewiesen (1) reinigen Wolbachia Symbionten aus kultivierten Zellen Mücke, (2) mit einem Fluoreszenz-Assay, um die Lebensfähigkeit des gereinigten Wolbachia zu ermitteln und (3) halten die jetzt extrazellulären Wolbachia in zellfreien Medium . Gereinigtes Wolbachia lebendig bleiben in der extrazellulären Phase aber nicht replizieren, bis in eukaryotischen Zellen wieder geimpft. Extrazelluläre Wolbachia auf diese Weise gereinigte bleibt für mindestens eine Woche lebensfähig bei Raumtemperatur und möglicherweise länger. Gereinigtes Wolbachia sind für die Mikro-Injektion, DNA-Extraktion und andere Anwendungen geeignet.