Blaastumoren zijn gevestigd in vrouwelijke muizen in een minimaal invasieve wijze via catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende aanhechting van carcinoom cellen om de branden sites.
Abstract
In deze eenvoudige procedure, zijn blaastumoren gevestigd in vrouwelijke C57 muizen door het gebruik van de catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende celadhesie. Na hun blazen zijn transurethrally gecatheteriseerd en afgevoerd, zijn dieren weer gecatheteriseerd het inbrengen van een platina draad in blazen toestaan zonder beschadiging van de plasbuis of blaas. De catheters zijn gemaakt van Teflon om te dienen als een isolator voor de draad, die elektrische stroom voert in de blaas om een brandwond creëren. Een elektrocauterisatie eenheid wordt gebruikt voor het afleveren 2,5 W aan het blootgestelde uiteinde van de draad, wegbranden extracellulaire lagen en het verstrekken van bevestiging sites voor carcinoom cellen die in suspensie geleverd aan de blaas door middel van een latere catheterisatie. Cellen blijven in de blaas gedurende 90 minuten, waarna de katheters zijn verwijderd en de blaas op natuurlijke wijze af te voeren. De ontwikkeling van de tumor wordt bewaakt via een echografie. Specifieke aandacht wordt besteed aan de catheterisatie techniek in de bijbehorende video.
Protocol
1. Dieren Vrouwelijke C57BL/6J muizen (Mus musculus) zijn geverifieerd vrij van besmettelijke ectoparasieten, worminfecties endoparasieten, en antilichamen tegen 17 muriene virussen door de verkoper voor de verzending. Muizen zijn ondergebracht in de AAALAC-geaccrediteerde dier faciliteit van Tulane University in overeenstemming met de Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren. 1 In het bijzonder, muizen zijn gehuisvest groep (4-5 muizen / kooi) in individueel geventi…
Discussion
Deze minimaal invasieve methode voor de vaststelling orthotope blaas tumoren in vrouwelijke muizen kan ook worden toegepast voor celtypes andere dan de MB49, hoewel verschillende resultaten moeten worden verwacht. Als er minder agressieve tumorcellen worden gebruikt, zal het verhogen van de wattage licht (met behulp van 0,5 W stappen naar de nieuwe optimale stand) leveren een oppervlakte van meer vatbaar zijn voor tumorcellen gehechtheid, en langere blaas incubatietijden voor de bijgebracht cellen zullen een grotere hoe…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door de National Science Foundation LOOPBAAN award (cbet-0846395) en de Vakgroep Vergelijkende Geneeskunde, Tulane University.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
C57Bl/6J mice
Jackson Laboratories
000664
3-5-wk-old
Polycarbonate cages and ventilated rack
Lab Products
Super Mouse 750
327mm x 190mm x 143mm
Hardwood Bedding
Harlan Teklad
Laboratory –grade SaniChips
Rodent diet
Harlan Teklad
Rodent Diet 2019
IV Catheter
MWI
009231
24 G x ¾ in.
Electrocautery unit
Bovie Medical Corporation
Aaron 900
Ultrasound unit
Sonosite
180 Plus (Vet)
MB49 cell line
Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center