果蝇睾丸可迅速和有效地从成年男性使用解剖针分离。通过实践,人们可以很容易地在一至两天隔离睾丸足够的抗体或酶为基础的分析的高通量测序或更传统的分子生物学方法分析的DNA或RNA或蛋白质的量。
果蝇睾丸干细胞维持和分化,减数分裂和SOMA的生殖细胞相互作用的研究提供一个重要的模式。隔离成年男性的睾丸通常从蛹的情况下羽化后0-3天。野生型果蝇的睾丸很容易区别于其他组织的,因为他们是黄色的,但白突变的果蝇睾丸,一个共同的遗传背景的实验室实验飞肠道的形状和颜色相似。表演夹层玻璃显微镜玻片上,一个黑色的背景,使得相当容易识别的睾丸。睾丸被删除的苍蝇,用解剖针。使用睾丸清扫钳的协议相比,我们的方法是远远更快,允许一个良好的实践个人剖析每小时从200-300野生型果蝇睾丸,产生400-600睾丸。 白蝇,或从突变体,减少睾丸大小的睾丸更难解剖,通常每小时产量200-400睾丸。
我们提供了协议隔离成年雄性果蝇睾丸。由于技术要求协调人的两只手,技能只有与实践。
The authors have nothing to disclose.
作者感谢Vasia Vagin这种技术引入到我们的实验室。