שיטה זו מתארת כיצד לנתח ולהעריך התפתחות תפקוד בלוטת החלב ומן העכברים. בלוטות החלב נכרת מוערכים לתואר הפיתוח באמצעות הר שלם תוך פליטה החלב מוערך באמצעות אוקסיטוצין מבוססי assay myoepithelial התכווצות התא.
בלוטת החלב האנושי מורכב האונות 15-20 כי חלב מפרישים לתוך הפתח הסתעפות מערכת צינור לעבר הפטמה. אונות אלו הן עצמם מורכבת ממספר יחידות מסוף אונתית צינור עשוי alveoli הפרשה ותעלות מתכנסים 1. בעכברים, ארכיטקטורה דומה שנצפה הריון שבו צינוריות ו alveoli משובצים בתוך stroma רקמת החיבור. אפיתל עכבר בלוטת החלב הוא עץ כמו מערכת של צינורות מורכב משתי שכבות של תאים, השכבה הפנימית של תאים luminal מוקף שכבה חיצונית של תאים myoepithelial כונה על ידי לגבולות קרום המרתף 2. בזמן הלידה, רק עץ ductal rudimental קיים, המורכב סניפים הדביק 15-20 העיקרי. סניף התארכות ולהתחיל הגברה בתחילת גיל ההתבגרות, סביב 4 שבועות, תחת השפעה של הורמונים 3,4,5. ב 10 שבועות, רוב stroma הוא פלש ידי מערכת מורכבת של צינורות כי יעברו מחזורים של הסתעפות ונסיגה כל מחזור הייחום עד ההריון 2. עם תחילת ההריון, השלב השני של הפיתוח מתחיל, עם התפשטות והבחנה של אפיתל ליצירת ענבים בצורת הפרשה חלב מבנים קרא alveoli 6,7. לאחר הלידה ובמהלך ההנקה, החלב מיוצר על ידי תאים הפרשה luminal ו מאוחסן בתוך לומן של alveoli. לשחרר אוקסיטוצין, מגורה על ידי רפלקס עצבי המושרה על ידי היניקה של הגורים, גורמת להתכווצויות מסונכרן של תאים myoepithelial סביב alveoli לאורך צינורות, המאפשר חלב להיות מועבר דרך הצינורות אל הפטמה שבה הוא הופך להיות זמין עד 8 גורים. התפתחות בלוטת החלב בידול, ותפקוד הם דורשים מתוזמר היטב, לא רק אינטראקציות בין stroma את האפיתל, אך גם בין תאים myoepithelial ו luminal בתוך האפיתל 9,10,11. ובכך, מוטציות בגנים רבים מעורבים אינטראקציות אלה עלולים לפגוע גם התארכות ductal במהלך היווצרות ההתבגרות או alveoli במהלך ההריון התמיינות מוקדם במהלך ההריון המאוחרות ההפעלה הפרשה המוביל הנקה 12,13. במאמר זה, אנו מתארים כיצד לנתח בלוטות החלב עכבר ולהעריך את התפתחותם באמצעות mounts כולו. אנחנו גם מדגימים כיצד להעריך התכווצויות myoepithelial ואת פליטת חלב באמצעות לשעבר vivo אוקסיטוצין מבוססי assay תפקודית. ההשפעה של מוטציה בגן על התפתחות בלוטת החלב לתפקד ולכן יכול להיקבע באתרו על ידי ביצוע שתי הטכניקות הללו בעכברים מוטציה מלאה ו wild-type.
התפתחות בלוטת החלב הם פונקציה מתוזמר היטב. עכברים Mutant עשוי הנמל מוטציות גנטיות שיכולות לפגוע בהתפתחות בלוטת החלב לתפקד הדגשת הצורך להעריך ארכיטקטורה בלוטת 13,12. הרכבה שלם ניתן לבצע כפי שמתואר במאמר זה בכל שלבי התפתחות בלוטת החלב. בדרך כלל, פיתוח של האפיתל נבחנת ?…
The authors have nothing to disclose.
מחקרים אלו מומנו על ידי CIHR ומענקים CBCRA ל DWL. IP מומן על ידי מלגות CIHR מ-STP, FRSQ ו CIHR. MKGS מומן על ידי מלגות OGS CIHR ו-STP. המחברים מודים קווין בר עזרתו עם גידול העכבר.
Reagent | Company | Catalogue number |
---|---|---|
Carmine | Sigma-Aldrich | C1022 |
Aluminum potassium sulfate | Sigma-Aldrich | A6435 |
Thymol | Sigma-Aldrich | T0501 |
Methyl salicylate | Sigma-Aldrich | M6752 |
Oxytocin | Sigma-Aldrich | O3251 |